Sistema de incubación en bolsas gaseadas: alternativa al cultivo in vitro de embriones bovino

• Autores: Noelia González Ortí, Lydia Gil Huerta, Mayela Gallegos de la Hoya, Emilio Espinosa Velázquez, Agustín Josa Serrano
• Localización: Agrofaz: publicación semestral de investigación científica, ISSN 1665-8892, Vol. 5, Nº. 1, 2005, págs. 689-696
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Control Gassed Bag In Vitro Culture: An Alternative to Conventional In Vitro Bovine Embryo Culture
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• Resumen
  • español

    Dada la importancia del control de gases durante el cultivo embrionario, en este trabajo se compararon tres sistemas de cultivo embrionario. Uno de ellos sin control completo de gases en una estufa incubadora de CO2 (a), y los otros dos utilizando bolsas gaseadas con control, ya sea en un sistema de incubación submarino (b) o en la estufa incubadora (c). En el caso de existir control de gases, las proporciones de los mismos fueron del cinco por ciento CO2, 95 por ciento N2 y cinco por ciento O2, mientras que en el caso de la estufa incubadora únicamente se controló el CO2, (5%). En cada uno de los sistemas se valoró el clivaje y el desarrollo hasta los estadios de cuatro y ocho células. Se encontraron diferencias altamente significativas (p < 0.001) en los tres niveles de desarrollo entre los tres sistemas de cultivo embrionario. En primer lugar quedaría el sistema de bolsas gaseadas en la estufa incubadora: 44.6, 34.6 y 21.6 por ciento para los estadios de clivaje, 4 y 8 células respectivamente. En segundo lugar estaría el sistema de incubación submarino: 39.8, 33.8 y 19.3 por ciento. Y en último lugar la estufa incubadora de CO2: 30.7, 18.1 y 9.6 por ciento. Con estos resultados se puede concluir que la utilización de bolsas gaseadas es un buen sistema para llevar a cabo el cultivo embrionario. Por ello es una opción interesante a tener en cuenta en laboratorios donde no se dispone de una infraestructura para el control de gases.

  • English

    Controlling gas atmosphere is essential for successful in vitro embryo culture. In this study the use of sealed gas bags containing an appropriate mixture of gases in which culture dishes are individually placed before introducing into the incubator was evaluated. Three bovine embryo culture systems were evaluated: (a) gas bag in a conventional incubator; (b) gas bag in a submarine incubator; and (c) a CO2 incubator. The mixture of gases used in the bags was 5 percent CO2, 95 percent N2 and 5 percent O2, whereas in system (c) only the CO2 level was controlled (at 5%). Results were assessed in terms of the in vitro maturation and in vitro fertilization of cow ovocytes at three developmental stages: cleavage, 4-cell stage and 8-cell stage. Chi-squared analysis revealed significant differences (p<0.001) between the three systems at each developmental stage. Rates for the three stages (cleavage, 4-cell and 8- cell, respectively) were: 44.6, 34.6, and 21.6 percent for system (a); 39.8, 33.8, and 19.3 percent for system (b); and 30.7, 18.8, and 9.6 percent for system (C). These findings indicate that the use of gas bags seems to be a good system for in vitro embryo culture. This system might be of particular interest for laboratories without facilities for controlling gas levels.