Resumen de Técnicas de aislamiento de clostridium spiroforme a partir de casos de enteritis en conejos
Juan Luis Maldonado, Albert Pagès Manté, M. Alfonso, E. Martínez, C. Artigas
- español
El diagnóstico presuntivo de la enterotoxemia de los conejos, causada por cepas productoras de toxina Iota de C. spiroforme (SMD), se basa en la demostración de la bacteria en el intestino del animal afectado. La visualización de bacterias Gram positivas de forma circular o espiral en una impronta del contenido cecal es la técnica de rutina.
Sin embargo, el diagnóstico definitivo de la SMD comprende el aislamiento y la identificación de la bacteria y su toxina.
El objetivo de este estudio, fue el de comparar 4 técnicas para la detección o el cultivo de C. spiroforme a partir de heces de conejos con o sin lesiones de enteritis. 54 casos clínicos (1 a 5 conejos menores de 60 días de vida) procedentes de diversas explotaciones cunícolas de Cataluña, Levante, Aragón y Portugal, fueron sometidos a necropsia entre julio del 2002 y diciembre del 2003. Durante la necropsia se realizó: a) Valoración de las lesiones entéricas; b) Siembras bacteriológicas; c) impronta del contenido cecal y d) recogida de contenido cecal. En el laboratorio, tras centrifugación de las heces (4ºC, 20.000x, 15 min) se realizó una segunda impronta y un segundo cultivo en anaerobiosis estricta, a partir de la interfase entre el sobrenadante y el pellet. El cultivo e identificación bacterianas, así como la detección de eimeria sp. se realizaron mediante protocolos estándar. De los 54 casos clínicos analizados para la presencia de C. spiroforme, 30 (55.5%) fueron negativos y 13 (24.1%) fueron positivos a las 4 técnicas simultáneamente.
La centrifugación previa del contenido cecal incrementó la proporción de improntas positivas en un 14.8%. Sin embargo, en ninguno de estos casos se consiguió el aislamiento de C. spiroforme. En la necropsia se observaron 44 casos con lesiones macroscópicas y 9 sin ellas (un caso no fue documentado). De estos últimos, 1 (un grupo de 3 animales) fue positivo a C. spiroforme en la impronta tras centrifugación. Este resultado concuerda con otros trabajos que reportaron la presencia de C. spiroforme en animales aparentemente sanos. Los resultados obtenidos corroboran la utilidad de la centrifugación previa de las heces, para incrementar el éxito de la detección de C spiroforme, no así el incremento de cultivos viables de la bacteria.
- English
Presumptive diagnosis of rabbit enterotoxemia caused by C. spiroforme Iota toxin-producing strains (SMD), is based on the demonstration of the presence of the bacteria in the intestine of the affected animals.The observation of Gram positive, round or spiral shaped bacteria in a caecal smear is the routine technique. Nevertheless, the final diagnosis of the SMD should be based on the isolation and the identification of the bacteria and its toxin.The objective of this study was to compare 4 techniques for the detection or the cultivation of C. spiroforme from feces of rabbits with or without enteritis. 54 clinical cases (1 to 5 rabbits less than 60 days old) coming from diverse rabbit herds of Catalonia, the Eastern Mediterranean coast, Aragon and Portugal, were submitted to necropsy between July 2002 and December 2003.The following procedures were carried out in the necropsy: a) Appraisal of the enteric lesions; b) bacterial cultures, c) smear from the caecal contents and d) collection of caecal contents. In the laboratory, after centrifugation of the caecal contents (4ºC, 20,000x, 15 min.), a second smear and a second bacterial culture were carried out of the surface of the pellet.The cultivation and bacterial identification, as well as the detection of Eimeria sp. were carried out by means of standard protocols. Of the 54 clinical cases analyzed for the presence of C. spiroforme, 30 (55.5%) were negative and 13 (24.1%) were simultaneously positive for all 4 techniques. The centrifugation of the caecal contents increased the proportion of positive smears by 14.8%. Nevertheless, in none of those cases, it was possible to isolate C. spiroforme. In the necropsy, 44 cases with macroscopic lesions and 9 without them were observed (one case was not documented). Of the latter, 1 (a group of 3 animals) was positive to C. spiroforme in the smear after centrifugation. This result agrees with other works that reported the presence of C. spiroforme in apparently healthy animals.The results obtained corroborate the usefulness of the centrifugation of the caecal contents for increasing the success of the detection of C spiroforme, but not the increment of viable bacteria for cultivation.
