Construcción de mutantes de Salmonella entérica por inactivación de los genes invG/invE y ssaJ/ssaK de las islas de patogenicidad 1 y 2

• Autores: Judith Velasco, María Araque, Juan A. Ayala
• Localización: Revista Colombiana de Biotecnología, ISSN 0123-3475, ISSN-e 1909-8758, Vol. 12, Nº. 2, 2010, págs. 55-66
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Constructing Salmonella enterica mutants for inactivating invG/invE y ssaJ/ssaK genes from pathogenicity islands 1 and 2
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• Resumen
  • español

    Para la comprension de las bases geneticas de los mecanismos de patogenicidad de Salmonella se han descrito diversas metodologias para manipular el ADN genomico y generar mutantes con caracteristicas particulares.

    En este estudio se reporta la construccion de mutantes a partir de varios serotipos de S. enterica, por sustitucion e inactivacion de los genes invG/invE en SPI-1 y de los genes ssaJ/ssaK en SPI-2 mediante la tecnica de recombinasa Red del fago �É descrita por Datsenko y Wanner (2000). Los genes delecionados en las SPI-1 y SPI-2 codifican para las proteinas que participan en la formacion de los sistemas de secrecion tipo III, responsables de la invasion y supervivencia intracelular de S. enterica en las celulas hospedadoras. Los resultados de este trabajo permitiran realizar estudios futuros in vivo para evaluar la posible atenuacion de la virulencia de las cepas mutantes, asi como aportar nuevos conocimientos sobre los mecanismos geneticos involucrados en la fisiopatogenia de las enfermedades producidas por los serovares estudiados. Ademas, esta tecnica se recomienda para generar de manera eficiente mutantes de diferentes serotipos de Salmonella enterica con la finalidad de estudiar los genes cromosomicos y sus productos.

  • English

    Several methods have been described for manipulating and producing mutant genomic DNA having specific characteristics in an attempt to understand the genetic basis for Salmonella pathogenicity. This study reports the construction of mutants from several S. enterica serotypes, the substitution and inactivation of invG/invE genes in the SPI-1 gene and ssaJ/ssaK in the SPI-2 gene by the phage ë Red recombinase technique, as described by Datsenko and Wanner (2000). Gene deletion in SPI-1 and SPI-2 encodes proteins involved in the formation of type III secretion systems responsible for S. enterica invasion and intracellular survival in host cells. The results of this work will lead to in vivo studies evaluating the possible attenuation of mutant strain virulence and provide new insights into the genetic mechanisms involved in the pathogenesis of diseases caused by these bacteria. Moreover, this technique is recommended for efficiently generating mutants from different S. enterica serotypes for studying chromosomal genes and their products.