Resumen de Electroactivation of zebrafish (Danio rerio) eggs

J. Cardona Costa, M. Pérez Camps, Fernando García Ximénez

• español

  En pez cebra, una vez que los oocitos son descargados del estroma ovarico, su activacion inicial por contacto en agua da lugar a divisiones normales unicamente cuando son fertilizados. Cuando no se utiliza semen (inactivado geneticamente o no), las tecnicas reproductivas (como transplante nuclear o inyeccion espermatica intracitoplasmatica) son ineficientes.

  En el presente trabajo se desarrollaron tres experimentos de activacion oocitaria por estimulos electricos: en el primero de ellos, se compararon seis tratamientos de activacion (Voltaje �~ Pulsos: 2,76�~ �~1; 2,76 �~ 2; 2,76 �~ 3 y 5,40 �~ 1;

  5,40 �~ 2; 5,40 �~ 3). El grupo 5,4 �~ 3 mostro los mejores resultados (32% de activacion). En el segundo experimento, se evaluo un tratamiento electrico de 20 min de duracion. El tratamiento consistio en la aplicacion de una secuencia de tres estimulos iguales cada 10 min (de 1 o 3 pulsos de corriente continua y onda cuadrada de 20 �Ês de duracion cada uno y evaluado a dos niveles de voltaje: 2,76 V y 5,4 V). En este trabajo se observo que el numero de pulsos afecto negativamente a los oocitos, incrementandose los porcentajes de oocitos danados y lisados. Ademas, la combinacion de 20 min y 3 pulsos consecutivos de 2,76 V logro diferencias significativas con su grupo control (43% vs 18% oocitos activados, p < 0,05). En el tercer experimento, se observaron efectos negativos como consecuencia del envejecimiento oocitario. En conclusion, el mejor tratamiento de activacion para oocitos de pez cebra intactos (no manipulados) fue la secuencia B3.

  El estimulo de activacion electrica propuesto seria el unico disponible una vez que los oocitos han sido activados por agua.

• English

  In zebrafish, initial egg activation by water after being discharged from the ovarian stroma is followed by normal cleavages only in inseminated eggs. When sperm (genetically active or not) is not used as activating agent, reproductive techniques (as either nuclear transplant or intracytoplasmic sperm injection are ineff icient. In this work, three experiments of egg activation by electric stimuli were performed: In the first, six activation treatments were compared (Voltage �~ Pulses: 2.76 �~ 1; 2.76 �~ 2; 2.76 �~ 3 and 5.40 �~ 1; 5.40 �~ 2; 5.40 �~ 3). The group 5.40 �~ 3 showed the best results (32% activated). In the second experiment, an electrical treatment of 20 min was carried out. It consisted in a sequence of three equal electrical stimuli every 10 min (of 1 or 3 consecutive direct current square pulses for 20 �Ês each and applied at two voltage levels, 2.76 V or 5.4 V). It was observed that the number of pulses negatively affected the rates of damaged and lysed eggs. Moreover, only the 20 min treatment with the combination of 3 consecutive pulses at 2.76 V showed significant differences with their respective control group (43% vs 18% activated eggs, p < 0.05). In the third experiment, negative effects of egg ageing were observed. In conclusion, the best activation treatment for intact (non manipulated) zebrafish eggs concerns sequence B3. The electro-activation stimulus proposed here would be the only one available once the egg has already been activated by water.