Evaluación del desarrollo embrionario de ovocitos bovinos madurados y fecundados in vitro obtenidos a partir de hembras mestizas

• Autores: F.J. Báez Contreras, J.A. Landinez Aponte, H.J. Hernández Fonseca, P.C. Villamediana Monreal
• Localización: Revista de la Facultad de Agronomía de La Universidad del Zulia, ISSN-e 2477-9407, Vol. 27, Nº. 3, 2010, págs. 460-478
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Evaluation of embryonic development of bovine oocytes in vitro matured and fertilized obtained from crossbred females
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• Resumen
  • español

    El objetivo de este trabajo fue evaluar el desarrollo, calidad y condiciones de cultivo de embriones bovinos producidos in vitro (PIV). Para ello, se recuperaron los ovarios de hembras mestizas sacrificadas en un matadero comercial.

    Fueron seleccionados los ovocitos con al menos una capa de celulas del cumulus y citoplasma homogeneo, para luego ser madurados, fecundados y cultivados in vitro. Tras 48 horas post-inseminacion (hpi) se determino la tasa de division embrionaria y a los 7 dias de cultivo se valoro el porcentaje de blastocistos. Un grupo de embriones continuaron en cultivo hasta el dia 8 para evaluar las condiciones de cultivo sobre el numero y calidad de blastomeras. Todos los embriones fueron sometidos a una doble tincion diferencial con Hoechst 33342 (10 ug.mL-1)+ ioduro de propidio (IP) (10 ug.mL-1) para determinar el total de blastomeras (azules), consideradas intactas, e identificar las que mostraron membrana alterada (rojas). El porcentaje de division embrionaria a las 48 hpi fue de 62,61%. A los 7 d de cultivo (8d pi), el numeros de blastocistos fue de 76, equivalente al 18,18%. Se encontraron diferencias estadisticamente significativas (P<0,05) en el numero total de celulas con membrana normal (103,6+-9;

    112,2+-13,5) y positivas a IP (4,05+-2,3; 9,8+-6,2) a los 7 y 8 d de cultivo, respectivamente. La calidad de los embriones PIV valorada mediante la tinción diferencial demostró que la mayoría de las blastómeras no mostró alteración de membrana. Es el primer reporte que se realiza sobre PIV de embriones bovinos para la región zuliana

  • English

    The aim of this study was to evaluate the development, quality and culture conditions of IVP bovine embryos. Ovaries of crossbred females collected in a commercial slaughterhouse were transported to the laboratory. Oocytes with at least one layer of cumulus cells and homogeneous cytoplasm were selected, and then matured, fertilized and cultured in vitro. After 48 h post-insemination (pih) the cleavage rate and blastocysts rate at day 7 after pi was determined. A group of embryos remained in culture until day 8 to evaluate the culture conditions on the number and quality of blastomeres. All embryos were subjected to a double differential staining with Hoechst 33342 (10 mg.mL-1) + propidium iodide (PI) (10 mg.mL-1) to determine the total number of blastomeres (blue), intacts or with altered cell membrane (red). The cleavage rate after 48 pih was 62.61%. Whereas after day 7 of cultivation (8d pi), the number of blastocyst was 76, equivalent to 18.18%. Differences were statistically significant (P<0.05) in the total number of cells with normal membrane (103.6±9; 112.2±13.5) and positive IP (4.05±2.3; 9.8±6.2) for 7d and 8d of culture, respectively. The quality of IVP embryos measured by double staining demonstrate that most of the blastomeres no alteration cell membrane. This is the first report that for done in vitro production (IVP) of bovine embryos from the Zulian region.