Expresión de la proteína E del virus del Oeste del Nilo en callos embriogénicos de maíz, transformados mediante biobalística

• Autores: Luís Gómez-Núñez, María Teresa de Jesús Olivera Flores, Lilia Soto Ruiz, Miguel Ángel Gómez-Lim, Elizabeth Loza Rubio
• Localización: Revista Mexicana de Ciencias Pecuarias, ISSN 2007-1124, ISSN-e 2448-6698, Vol. 2, Nº. 1, 2011, págs. 1-14
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • West Nile virus E protein expressed in transformed corn embryogenic callus type II, by biobalistic
• Enlaces
  • Texto completo
• Resumen
  • español

    La clonación y expresión heteróloga de antígenos de agentes patógenos que afectan humanos y animales, ha demostrado ser una buena alternativa para la obtención de vacunas subunitarias. En este estudio se analiza la expresión estable del gen E que codifica la glicoproteína de envoltura del virus del Oeste del Nilo (VON) en callos embriogénicos de maíz, que fueron transformados mediante biobalística empleando el promotor constitutivo CAMV35S. La expresión del transgen fue determinada mediante RT-PCR en los callos embriogénicos de maíz transformados con la secuencia codificante de la glicoproteína E del VON. Para verificar la expresión de la proteína se realizó un Western blot con extractos de la proteína soluble total (PST) de los callos transformados. De esta manera se identificó una proteína de 68 kDa. Empleando este sistema de expresión se pudo obtener un 0.86 % de PST. En este estudio por primera vez se analiza la expresión de la glicoproteína E del virus del Oeste del Nilo en callos embriogénicos de maíz.

    Siendo la glicoproteína E del VON la responsable de la inducción de la inmunidad en contra de este virus, esta investigación representa un avance importante en el diseño de un inmunógeno experimental, que permitiría iniciar estudios en animales de laboratorio, con la finalidad de obtener una vacuna prototipo para la prevención y el control de la infección por el VON.

  • English

    Cloning and heterologue expression of antigens to pathogenic agents which affect humans and animals is an effective way of producing subunitary vaccines. An analysis was done of stable expression of the E gene coding for the West Nile Virus (WNV) envelope (E) glycoprotein in corn type II embryogenic callus transformed with biobalistics using the constitutive CAMV35S promoter. This protein is responsible for WNV immunity induction. Transgene expression in transformed calluses with the WNV E glycoprotein was identified by RT-PCR. Western Blot was used to verify protein expression with total soluble protein (TSP) extracts from the transformed calluses. A 68 kDa protein was identified and 0.86 % TSP attained. This WNV E glycoprotein production system allows production of this protein in almost half the time of conventional techniques, a significant advance in experimental immunological design. This is the first time that this kind of evaluation was done. We suggest evaluating the transformed embryogenic calluses in animals by oral route in order to test its efficacy as a candidate of vaccine.