Caracterización biológica y acción de inhibidores de una fosfolipasa A2 del veneno de Lachesis muta

• Autores: Rosalina Inga, Dan Vivas, Pedro Palermo, Julio Mendoza, Fanny Lazo, Armando Yarlequé
• Localización: Revista peruana de biología, ISSN-e 1727-9933, Vol. 17, Nº. 1, 2010, págs. 123-128
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Biological characterization and inhibitors action of Phospholipase A2 from Lachesis muta venom
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    El presente trabajo informa de la purificacion y caracterizacion bioquimica y biologica de la fosfolipasa A2 (PLA2) de Lachesis muta (Linnaeus, 1766). La purificacion se realizo por cromatografia liquida (CL) usando CM-Sephadex C-50 y Sephadex G-50, obteniendola al estado homogeneo con un peso molecular de 18749 Da. Los ensayos con PLA2 realizados sobre fosfolipidos de yema de huevo y lecitina comercial, mostraron que los agentes EDTA, PMSF, glutation y cisteina, inhibieron la actividad con valores mayores al 50%. La PLA2 de L. muta produjo un notable efecto anticoagulante, observandose un retardo de 2�f30�h en el tiempo de coagulacion con 9,6 �Êg de la enzima. La hemolisis indirecta sobre eritrocitos humanos dio un equivalente de 4,35 �Êg como dosis hemolitica media (HD50). Los valores de dosis edematica media y dosis miotoxica minima fueron de 91,5 �Êg y 125,89 �Êg/mL respectivamente; valores por debajo de PLA2 de otros venenos. No se registro actividad hemorragica directa. Las pruebas de inmunodifusion e inmunoelectroforesis revelaron que PLA2 de L. muta tuvo reactividad inmunogenica contra el antiveneno lachesico monovalente (INS-Peru). Sin embargo, la neutralizacion por el antiveneno fue parcial.

  • English

    In the present study, phospholipase A2 (PLA2) from Lachesis muta (Linnaeus, 1766), is isolated, purified and characterized biochemically and biologically. Purification was performed by liquid chromatography (LC) using CM-Sephadex C-50 and Sephadex G-50, homogenized enzyme had a molecular weight of 18749 Da. Trials with egg yolk phospholipids, and commercial lecithin showed that EDTA, PMSF, glutathione and cysteine inhibited the activity with values greater than 50%. The PLA2 had a significant anticoagulant effect, showing a delay of 2'30" on the coagulation time with 9.6 ìg of the enzyme. The indirect impact on human erythrocyte hemolysis gave an equivalent of 4.35 ìg as HD50. Mean edematic dose and minimum myotoxic dose were 91.5 mg and 125.89 mg / mL respectively, these values were below enzymes phospholipase A2 from others poisons. There was no hemorrhagic activity. Immunodiffusion tests and immunoelectrophoresis revealed that the PLA2 of L.

    muta was immunogenic reactivity against lachesic monovalent antivenom (INS-Peru). However, the neutralization by the antivenom was partial.