Resumen de La depleción de células CD34+/CD144+ en pacientes de revascularización miocárdica no está mediada por un aumento de la apoptosis inducida por el TGF-beta plasmático

Marta Ramajo, Santiago Redondo Blasco, A. González Rocafort, Jorge Navarro Dorado, Fernando Reguillo La Cruz, Manuel Carnero, José Martínez González, Enrique Rodríguez, Mª Teresa Tejerina

• español

  Introducción: La arteriosclerosis coronaria se ha relacionado con la depleción y la alteración funcional de las células progenitoras endoteliales (EPC). Nos propusimos determinar el número de células CD34+/KDR+ y CD34+/CD144+ en pacientes sometidos a revascularización miocárdica quirúrgica, comparados con pacientes operados de recambio valvular, así como el efecto de su plasma sobre EPC cultivadas de donantes sanos.

  Métodos: El número de CD34+/KDR+ y CD34+/CD144+ se determinó por citometría de flujo. Las EPC cultivadas se obtuvieron de residuos leucoplaquetarios transfusionales. La apoptosis se midió por fragmentación de ADN. La expresión de CD34 y CD144 se determinó por Western blot.

  Resultados: Encontramos un menor número de CD34+/CD144+ en pacientes revascularizados comparados con los de recambio valvular, pero en ambos casos fue un número mayor que el hallado en sujetos sanos. El plasma de pacientes revascularizados tuvo un efecto antiapoptótico sobre EPC de sujetos sanos (al día 7 de aislamiento), y este efecto fue inhibido por los bloqueadores de la vía del TGF-beta1 SIS3 y SB-431542. Previo a ello, en el día 4, el plasma de los pacientes revascularizados aumentó la expresión in vitro de CD34 y CD1144.

  Conclusión: El plasma de los pacientes revascularizados es antiapoptótico y aumenta la expresión de CD34 y CD144 en EPC de donantes sanos. Por lo tanto, el número subóptimo de CD34+/CD144+ que se observa in vivo sugiere un defecto en su liberación de la médula ósea.

• English

  Introduction: Coronary atherosclerotic disease has been linked to endothelial progenitor cell (EPC) depletion and functional impairment. We assessed the number of CD34+/KDR+ and CD34+/CD144+ cells in coronary artery bypass grafting (CABG) patients, compared to valvular patients, and the apoptotic effect of the plasma from these two groups on early outgrowth cells (EOCs) from healthy donors.

  Methods: CD34+/KDR+ and CD34+/CD144+ cell numbers were assessed by flow cytometry. EOCs were obtained from buffy coats from healthy donors. Apoptosis was measured as DNA fragmentation. In vitro expression of CD34 and CD144 was assessed by Western blot.

  Results: We found a lower number of CD34+/CD144+ cells in CABG patients compared to valvular, but a higher number compared to healthy controls. Plasma from CABG patients decreased apoptosis in cultured EOCs from healthy donors (day 7); this effect was abrogated by the TGF-beta1 blockers SIS3 and SB-431542. Prior to apoptosis protection, in cultured cells from healthy donors (day 4), plasma from CABG increased CD34 and CD144 expression, contrary to what found in the blood of the patients.

  Conclusions: CABG patients possess a lower number of CD34+/CD144+ cells than valvular ones. Plasma from CABG patients is antiapoptotic for EOCs from healthy donors and increases the expression of both CD34 and CD144. Suboptimal number of CD34+/CD144+ in vivo may be mediated by a primary bone marrow defect rather than a deleterious effect of plasma.