Resumen de Desarrollo de una técnica de pcr para detectar virus maedi-visna (vmv) libre e integrado en células y aplicación al estudio de la infección calostral en corderos

M. Daltabuit Test, Ramón Antonio Juste Jordán, Eduardo Berriatua Fernández de Larrea

• español

  Se desarrolló una técnica de PCR para detectar virus maedi-visna (VMV) libre e integrado en células, se estudio su concordancia con una PCR-LTR y un ELISA de anticuerpos de probada eficacia en muestras de calostro de ovejas infectadas y se emplearon los tres ensayos para investigar la infección calostral por VMV en corderos. Los cebadores se diseñaron en una región conservada en las seis secuencias de VMV disponibles en GenBank y amplifican un producto de 744 pares de bases (pb). Se realizaron 856 ensayos incluidos 283 con la gag, e independientemente de la PCR empleada se observó una buena correlación entre la presencia de virus libre e integrado y esto es novedoso y plantea la importancia relativa de ambas formas víricas en la infección por VMV. En cambio, la concordancia entre las PCRs y el ELISA fue solo moderada y se corroboró que a menudo no se detecta VMV en animales seropositivos. Las PCRs detectaron VMV en la mayoría de calostros ingeridos por corderos que posteriormente a los 10 meses de edad fueron seropositivos y además la gag y en menor medida la LTR, también en algunos calostros de corderos que fueron seronegativos, probablemente porque tomaron menos cantidad de calostro que los seropositivos. Además de aportar mas evidencia de la asociación positiva entre la infección por VMV y el volumen de calostro con VMV ingerido, este resultado sugiere que la gag es más sensible que la LTR en esta matriz

• English

  A PCR test was developed to detect cell-free and cell-integrated maedi-visna virus (MVV), its degree of agreement with an LTR-PCR and an antibody ELISA of proven efficacy was analysed in colostrum samples and all three tests were employed to investigate colostral MVV infection in lambs. Primers were designed from gag gene sequences homologous in the six MVV sequences presently in GenBank, and amplify a 744bp fragment.

  856 assays were carried out including 283 with the new gag-PCR and a good correlation was observed between the presence of cell-free and -integrated MVV. This is novel and questions the relative role of the two viral forms in MVV infection. Instead, the correlation between PCR and ELISA results was only moderate and provided further evidence that MVV detection may fail in infected animals. The PCRs detected MVV in colostrum ingested by most lambs that later tested seropositive at 10 months-old and additionally, the gag-PCR and to a lesser extent the LTR-PCR, detected MVV in colostrum taken by lambs seronegative at 10 months-old most likely because they ingested less colostrum. As well as providing further evidence of the positive association between MVV infection and volume of MVV-containing colostrum ingested, this result suggest that the gag-PCR developed is more sensitive than the LTR-PCR used in this study.