J. M. López-Alcorocho Sánchez, Pedro Guillén García, E. Rodríguez Íñigo, Isabel Guillén Vicente, R. Caballero Santos, M. Guillén Vicente, F. García Gómez, Pedro Cuevas Sánchez
Objetivo Utilizar cultivos de fibroblastos sobre membranas de colágeno I/III para tratar la rotura del ligamento cruzado anterior (LCA).
Material y método Estudio prospectivo con 100 biopsias de LCA de pacientes con rotura de LCA con las que se realizaron cultivos primarios de fibroblastos. Tras alcanzar 20-30 millones, se transfirieron a membranas de colágeno I/III, donde se determinó su disposición mediante tinción con hematoxilina-eosina y la expresión de los genes colágeno de tipo I (Col-I), colágeno de tipo III (Col-III), tenascina-C y Sox-9 mediante PCR en tiempo real.
Resultados A los 30 días de cultivo existía una correlación negativa entre la edad de los pacientes y la velocidad de crecimiento de los fibroblastos (p=0,003). La histología reveló que las células se disponían entre la malla formada por las fibras de las membranas, expresando Col-I, Col-III, Sox-9 y tenascina-C, características del ligamento.
Conclusión Es posible el establecimiento de cultivos primarios de fibroblastos derivados de LCA tanto in vitro como sobre membranas de colágeno I/III sin que pierdan sus características primarias de células de ligamento
Objective: To study the possibility on the use of the in vitro cultured on I/III collagen membranes for the treatment of the broken anterior cruciate ligament (ACL).
Patients and methodology: Prospective study performed with 100 ACL biopsies from patients with broken ACL, in which primary cultures of fibroblasts were established. When a number of 20-30 million was reached, they were transferred to I/III collagen membranes, where the architecture of the cells was examined by hematoxilin-eosin stained and the expression of the collagen type I (Col-I), collagen type III (Col-III), tenascin-C and Sox-9 genes by real time PCR.
Results: A negative correlation between the age of the patients and the growth rate of the fibroblasts after 30 days of setting-up the culture (p=0.003) was observed. The histology revealed that the cells were disposed within the membrane fibers net, where the cells expressed the characteristic proteins of the ligament: Col-I, Col-III, Sox-9 and tenascin-C.
Conclusion: It is possible to establish the primary culture of the ACL-derived fibroblasts, both in vitro and onto collagen I/III porcine membranes without losing their primary features of the ligament cells.
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