Resumen de Inmunolocalización hepática de CYP P450 en un experimento de toxicidad subaguda por Clorpirifos 0,0-dietil 0-(3, 5, 6-tricloro-2-piridil fosforotioato) en machos juveniles de tilapia (Oreochromis spp.)

Jenny Chaparro G., Diego Aranzazu Taborda, Laura Urrea, Berardo de J. Rodríguez

• español

  En Colombia son escasas las tecnicas de diagnostico implementadas con biomarcadores inmunohistoquimicos para realizar biomonitoreo de contaminacion ambiental. Objetivo: Implementar una tecnica inmunohistoquimica para inmunolocalizar CYP 1A en tejidos de peces, luego de realizar un experimento de exposicion subaguda al Clorpirifos en tilapias juveniles machos. Metodos: el experimento de dosis subletal, se realizo en un sistema semiestatico, con recambio diario del 50% del volumen de agua manteniendo la concentracion correspondiente en cada grupo experimental mediante la adicion de la mitad de la dosis hasta el dia 28. Las concentraciones de Clorpirifos para la exposicion fueron 4, 8, y 12 �Êg/L, en los grupos tratados y 0,0 �Êg/L en el grupo control. Se tomaron muestras para estudio histopatologico e inmunohistoquimico. Resultados: se encontro diferencia significativa (p<0,05) para algunas lesiones en el higado, confirmando que este es un organo de impacto de los efectos del Clorpirifos a bajas dosis. Se verifico la induccion de CYP 1A en el hepatocitos, endotelio y celulas biliares tanto de los animales expuestos como en los no expuestos. Desde el punto de vista multidimensional no se encontro diferencia estadistica entre los tratamientos para las variables estudiadas. Conclusion: se implemento y normalizo una tecnica de inmunohistoquimica para la inmunolocalizacion tisular de CYP 1A, que podra utilizarse en futuras investigaciones para realizar biomonitoreo de contaminacion en las cuencas hidrograficas de Colombia.

• English

  In Colombia the diagnostic techniques for implementing immunohistochemical biomarkers to fulfill biomonitoring of environmental contamination are limited. Objective: To implement an immunohistochemical technique to immunolocate CYP 1A in the tissue of fish, performing a subacute exposition experiment of Clofopirifos in the liver of young male tilapia. Methods: the sublethal dosage was carried out in semi-static state, with a daily refill of 50% of the water volume, maintaining the corresponding concentration in each group through the addition of half of the dosage until the 28th day. The Cloropirifos concentrations for the exposition were 4, 8, and 12 ìg/L in the treated groups and 0.0 ìg/L in the control group. Samples were taken for histopathological and immunohistochemical study.

  Results: A significant difference (p<0.05) for some liver lesions, confirming that it is an organ affected by low dosages of Cloropirifos. It verified that the induction of CYP 1A in hepatocyte, endothelium and biliary cells equally in exposed animals and those that weren't exposed. From a multidimensional perspective, no statistical difference was found between the treatments for the variables under study. Conclusion: this study implemented and normalized an immunohistochemical technique for the tissue immunolocation of CYP 1A that could be used in future investigations to fulfill biomonitoring of contamination in Colombia's hydrographic basins.

• português

  Na Colombia sao escassas as tecnicas de diagnostico realizadas com biomarcadores imuno-histoquimicos para realizar biomonitoramento da contaminacao ambiental. Objetivo: Estandardizar uma tecnica imuno-histoquimica para fazer imunolocalizacao do CYP 1a em tecidos de peixes, logo de realizar um experimento de exposicao subaguda ao Clorpirifos em machos juvenis de tilapia. Metodos: O teste da dose subletal realizou-se num sistema semiestatico, com recambio diario de 50% do volume de agua mantendo a concentracao correspondente em cada grupo experimental mediante a adicao da metade da dose ate o dia 28. As concentracoes de Clorpirifos para a exposicao dos peixes foram 4, 8 e 12 �Êg/L, nos grupos tratados e 0,0 �Êg/L no grupo controle. Tomaram-se amostras para o estudo histopatologico e imuno-histoquimico. Resultados: Encontrou-se diferenca significativa (p<0.05) para lesoes no figado, confirmando que este e um orgao que recebe diretamente o impacto dos efeitos do Clorpirifos em baixas doses. Verificou-se a inducao de CYP 1A nos hepatocitos, endotelio e celulas biliares tanto nos animais que estiveram expostos ao Clorpirifos quanto nos animais que nao estiveram expostos. Desde o ponto de vista multidimensional nao se encontrou diferenca estadistica entre os tratamentos para as variaveis estudadas. Conclusao:

  Estandardizou-se e normalizou-se uma tecnica de imuno-histoquimica para a imunolocalizacao tissular de CYP 1A, que podera se utilizada em futuras pesquisas para realizar biomonitoramento da contaminacao das bacias hidrograficas da Colombia, alem disto.