A genetic method for diagnosing lantana poisoning using a barcoding-based, genusspecific, polymerase chain reaction

• Autores: Francesc Francès Bozal
• Localización: Gaceta internacional de ciencias forenses, ISSN-e 2174-9019, Nº. 13, 2014, págs. 11-15
• Idioma: inglés
• Títulos paralelos:
  • Un método genético para el diagnóstico de intoxicación por lantana camara utilizando una reacción en cadena de la polimerasa, genero específica y basada en barcoding
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  • español

    INTRODUCCIÓN: Las especies de Lantana son altamente tóxicas, ya que contienen lantadenos y otros compuestos químicos. Aunque ocasionalmente se han reportado envenenamientos en humanos, el ganado en todo el mundo a menudo es vícitima de intoxicaciones por esta planta, lo que representa una grave pérdida de ingresos en muchos países. A fin de reducir la tasa de mortalidad entre los animales envenenados por lantana, se requiere un diagnóstico precoz y fiable. Nuestro objetivo, por lo tanto, es el desarrollo de una prueba genética para determinar la presencia de Lantana Camara y otras especies comunes de lantana en el contenido del tubo digestivo y productos fecales de ganado. MATERIAL Y MÉTODOS: Se ha realizado una comparación entre las secuencias del Internal Transcribed Spacer 1, 2 y de la subunidad 5.8 del ADN ribosómico de Lantana Camara y el resto de las especies disponibles, en la base de datos NCBI de nucleótidos utilizando la herramienta BLAST. Como resultado, varios fragmentos de ADN, altamente específico para Lantana fueron identificados. Se diseñaron cebadores de PCR para hibridar en estas secuencias.

    Finalmente, se utilizó un par de cebadores universales a fin de lograr una banda constante para todas las angiospermas.

    RESULTADOS: Nuestro diseño de PCR multiplex genera una banda constante que certifica el correcto desarrollo de la PCR en todas las angiospermas probadas. Sin embargo, en el caso del ADN Lantana Camara, se genera una banda específica y más ligera, lo que permite la identificación positiva de esta especie. DISCUSIÓN: La nuestra es la primera prueba específica para confirmar la intoxicación por Lantana Camara reportado hasta la fecha, y puede proporcionar una herramienta útil a los servicios veterinarios en los países donde la intoxicación lantana en el ganado es frecuente.

  • English

    INTRODUCTION: Lantana species are highly toxic as they contain lantadenes and other chemical compounds. While human poisonings have occasionally been reported, cattle throughout the world are often poisoned, which represents a serious loss of income in many countries. In order to reduce the mortality rate among lantana-poisoned animals, an early and reliable diagnosis is required. Our aim, therefore, is to develop a genetic test to determine the presence of Lantana Camara and other common lantana species in the content of the digestive tube and faecal products of cattle. MATERIAL AND METHODS: A comparison between Internal Transcribed Spacer 1, 2 and 5.8 subunit DNA sequences of Lantana Camara and all other species available in NCBI Nucleotide database has been undertaken using the BLAST tool. As a result, several DNA fragments, highly specific for Lantana were identified. PCR primers were designed to hybridize on these sequences. Finally, a pair of universal primers was used in order to achieve a constant band for all angiosperms. RESULTS: Our multiplex PCR design generated a constant band that certified the correct development of the PCR in all angiosperms tested. However, in the case of Lantana Camara DNA, a specific and lighter band was generated, allowing the positive identification of this species. DISCUSSION: Ours is the first specific test for confirming Lantana Camara poisoning reported to date, and may provide a useful tool to veterinary services in countries where lantana poisoning in cattle is frequent.