Implementation of the Intrauterine Artificial Insemination Technique in Lewis Rats for Harvesting Embryos used in Dental Tissue Engineering Projects

• Jaramillo Gómez, Lorenza María ^[1] ; Durán Correa, Camilo ^[1]
  1. [1] Pontífica Universidad Javeriana

     Pontífica Universidad Javeriana

     Colombia

     
• Localización: Universitas Odontológica, ISSN-e 2027-3444, Vol. 32, Nº. 69, 2013 (Ejemplar dedicado a: Universitas Odontologica), págs. 103-113
• Idioma: inglés
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• Resumen
  • español

    Antecedentes: El uso de ratas endocriadas Lewis en experimentos de trasplantes puede representar un reto, por los problemas de fertilidad asociados con esta cepa, que implican mantener colonias de producción grandes, a fin de poder recolectar suficiente tejido para usar en los experimentos; sin embargo, esta práctica va contra el principio de reducción. Propósito: Estandarizar el protocolo de inseminación artificial intrauterina (IAIU) en una cepa exocriada Sprague Dawley y posteriormente aplicarla en la colonia de ratas Lewis, para maximizar el número de hembras aptas fertilizadas. Métodos: Se inseminaron 41 ratas Lewis a las que se les había determinado el estro por medio de impedancia vaginal. Se realizó una laparotomía medioventral para localizar y exponer el tercio ovárico de los cuernos uterinos, los cuales fueron cuidadosamente elevados y 350 μl de una solución de espermatozoides/suero fisiológico al 0,9 % se inyectó en cada uno de los cuernos. Resultados: Bajo las condiciones experimentales presentes, la técnica de IAIU resultó efectiva en la cepa exocriada (promedio de 5,08 embriones). Al momento del sacrificio solo 12 hembras Lewis (29,3 %) eran portadoras de embriones con un promedio de 2,3 embriones por hembra. Conclusión: Cuando se aplicó la técnica de inseminación artificial intrauterina a la cepa de ratas Lewis, el número de hembras preñadas o el promedio de embriones no aumentó en comparación con los resultados obtenidos por medio de cruces naturales. Por consiguiente, no recomendamos la aplicación de esta técnica para el propósito planteado.

  • English

    Background: The use of Lewis inbred rats in embryonic tissue transplantation experiments can present a challenge because of the fertility problems associated with the strain that require large production colonies to harvest sufficient tissue for the experiments, but this practice goes against the principle of reduction. Purpose: In order to maximize the fertilization of apt females an intrauterine artificial insemination technique (IUAI) was standardized in a Sprague Dawley outbred strain and later applied to the Lewis inbred colony. Methods: 41 Lewis rats to which estral stage determination was performed by impedance reading of the vaginal wall were inseminated. A midventral laparotomy was performed, the ovarian third of both uterine horns were located and gently elevated, and 350 μl of spermatozoid/0.9% saline solution were injected in each horn. Results: Even though the IUAI proved to be effective for use in outbred Sprague Dawley rats under these experimental conditions (average 5.08 embryos) at the time of sacrifice only 12 Lewis females (29.3%) were carrying embryos and the average embryos collected per female were 2.3. Conclusion: When the intrauterine artificial insemination technique was applied to the Lewis strain the number of pregnant females or the average embryo yield did not increase when compared to natural mating and therefore we do not recommend its use for this purpose.