Resumen de Polimorfismos no SNP CGIL4: estudo de associação ao fenótipo de resistência a mastite clinica em vacas holandesas

Rachel Dias Molina, Débora Mara Kich, Tatiane Vendramin, Claucia Fernanda Volken de Souza, Daniel Neutzling Lehn, Adriane Pozzobon, Ivan Cunha Bustamante Filho

• English

  Bovine mastitis is the most important udder pathology and have a significant economic impact in the dairy industry. Its etiology is associated to problems with health and milking management. However, there are animals with resistance or susceptibility to mastitis, even when environmental factors are controlled. Recently, some molecular markers were associated to the phenotype of resistance to mastitis. The present study aims to verify if, based on clinical history of cows of second and third lactation, the SNP CGIL4 is associated to the phenotype of resistance to mastitis in Holstein cows in a herd in southern Brazil. Genomic DNA was obtained from blood samples of 160 Holstein cows (second and third lactation) from dairy herds from Rio Grande do Sul state, Brazil. Phenotype of resistance or susceptibility to clinical mastitis was defined based on animal’s clinical history, and the animal was classified as susceptible if presented at least 3 episodes of clinical mastitis during the last lactation.

  The identification of the CGIL4 SNP was performed using a PCR-RFLP. The association between genotipes and phenotipes was acessed by the χ 2 test. To detect polymorphism, Polymerase Chain Reaction (PCR) was performed using a touch-down PCR reaction producing an amplicon of 399 bp. The Restriction Fragment Length Polymorfism (RFLP) analysis was performed using TaqI restriction enzyme to identify the SNP (G→A). The association between genotipes and phenotipes was acessed by the χ 2 test. The most frequent genotype observed was GG (47.5%), AG with 45% and AA with 7.5%. Other results point AG as the most frequent genotype. Allele frequencies were 69.8% and 30.2% for the alleles G and A, respectively. No association was found between genotypes and phenotype of resistance and susceptibility to clinical mastitis, based in clinical records.

• português

  A mastite bovina é a principal patologia da glândula mamária e a maior causadora de prejuízos na produção leiteira. Sua etiologia é quase sempre relacionada a problemas de manejo sanitário e de ordenha. Entretanto, observa-se a existência de animais com maior ou menor resistência a mastite, mesmo quando fatores ambientais são controlados. Recentemente, alguns marcadores moleculares foram associados ao fenótipo de resistência a mastite. O presente estudo teve como objetivo verificar se com base no histórico de mastites clinicas em vacas de 2a e 3a lactação, o SNP CGIL4 está relacionado ao fenótipo de resistência a mastite em vacas holandesas em um rebanho no Sul do Brasil. Para obtenção do DNA genômico, foram utilizadas amostras de sangue de 160 vacas de segunda e terceira lactação de rebanhos tecnificados no Vale do Taquari, RS. O fenótipo de resistência ou susceptibilidade à mastite clínica foi determinado com base no histórico clínico dos animais, sendo classificada como susceptível a vaca com mais de 3 episódios da doença durante a lactação anterior. A identificação do SNP CGIL4 foi realizada através da técnica de PCR-RFLP. Foi utilizada uma PCR touch down para obter o amplicon de 399 pb. A analise de RFLP foi feita utilizando a enzima TaqI para identificar o SNP (G→A). A relação com o fenótipo e genótipo foi analisada pelo teste Qui-quadrado. O genótipo mais frequente observado foi GG (47,5%), seguido por AG com 45% e AA com 7,5%. O presente resultado difere de outros estudos que apontaram AG como o genótipo mais encontrado. As frequências alélicas foram 69,8% para o alelo G e 30,2% para o alelo A. Não foi observada associação entre os genótipos testados e fenótipos de resistência e susceptibilidade à mastite clínica baseada em registros clínicos.