Methodological variations in the amount of sample incubated and the type of rumen fluid used are commonly observed. This study evaluated the effect of three sample amounts (0.6, 1.3 or 2.6g DM 100mL-1 of rumen fluid) incubated in rumen fluid buffered (BRF-buffered rumen fluid) or not (PRF-pure rumen fluid) on total gas volume (TV), methane (CH4) production, dry matter degradation (DM Deg) and final pH of corn silage incubated in vitro. The highest DM Deg was reached with the lowest amounts of sample (0.6 and 1.3g of DM 100mL-1 of rumen fluid). The sample amount of 2.6g associated with PRF reduced CH4 production (P<0.05), compared with the amounts of 0.6 and 1.3g DM 100mL-1, which had similar CH4 production (P>0.05). The use of BRF caused no effect on CH4 production (P>0.05), independent of the sample amount. Increasing the amount of substrate resulted in lower final pH of incubation in both fluids (P<0.05). Our results indicate that incubations should be performed with the smallest amount of sample (0.6g of DM 100mL-1 of rumen fluid), using fluid without buffer. Incubation without buffer solution overestimates the CH4 production of corn silage. Further studies should be conducted to verify the possibility of in vitro ruminal incubation of other ingredients using pure rumen fluid.
Variações metodológicas sobre a quantidade de amostra incubada e o tipo de líquido ruminal utilizado são comumente observadas nas pesquisas. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de três quantidades de amostra incubada (0,6; 1,3 ou 2,6g MS 100mL-1) e dois tipos de líquidos ruminais (LRT-líquido ruminal tamponado ou LRP-líquido ruminal puro) sobre a produção total dos gases (VT) e de metano, a degradação da matéria seca (DegMS) e o pH final da incubação in vitro da silagem de milho. A maior DegMS da silagem de milho foi obtida com as menores quantidades de amostra incubada (0,6 e 1,3g MS 100mL-1). Para o LRP, a quantidade de 2,6g MS 100mL-1 reduziu (P<0,05) a produção de metano em comparação às quantidades de 0,6 e 1,3g MS 100mL-1, as quais não diferiram entre si (P>0,05). Utilizando o LRT, a quantidade de amostra não modificou (P>0,05) a produção de metano. Com o aumento da quantidade de amostra, houve redução do pH final da incubação em ambos os líquidos utilizados (P<0,05). Os resultados do presente experimento sugerem proceder a incubação com a menor quantidade de amostra, por proporcionar pH e DegMS mais elevados. A utilização de líquido ruminal tamponado reduz a produção de metano da silagem de milho. Novas pesquisas devem ser conduzidas para verificar a possibilidade de incubação ruminal in vitro com líquido ruminal puro utilizando outros ingredientes.
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