Resumen de Partial characterization of mycobacterium tuberculosis dosr regulated genes: Rv2626c, rv2625 and rv2624c
Elba Guerrero, Rossana Jaspe, Leiria Salazar
- español
Los genes Rv2626c, Rv2625c y Rv2624c del patógeno humano Mycobacterium tuberculosis pertenecen al regulón de persistencia o dosR, y su expresión se incrementa de manera significativa en diferentes condiciones asociadas a persistencia.
En este trabajo se realizó el análisis transcripcional de la región Rv2626c-Rv2624c por RT-PCR convencional y fusiones al gen gfp. Los datos sugieren que estos genes están organizados en un operón que se transcribe a partir de un promotor localizado en las 178pb que preceden a la secuencia codificante del gen Rv2626c. Usando el sistema BACTH se observó que las proteínas Rv2626 y Rv2625 interaccionan con ellas mismas formando homodímeros. Adicionalmente, se construyó una cepa mutante de M. tuberculosis que carece del gen Rv2625c, la cual también mostró una disminución significativa en la expresión de Rv2624c. Contrariamente a lo esperado, el crecimiento in vitro de las cepas mutante y silvestre fue igual durante el crecimiento vegetativo, estrés oxidativo y tratamiento con dosis bajas de óxido nítrico, lo que indica que estos genes no están involucrados en la respuesta protectora a las condiciones de estrés ensayadas
- English
The Rv2626c, Rv2625c and Rv2624c genes of the human pathogen M. tuberculosis belong to the persistence or dosR regulon and their expression is increased significantly under different persistence-related conditions. In this work the transcription of the Rv2626c-Rv2624c region was analyzed using conventional RT-PCR and promoter fusions to gfp. The data suggest that these genes are arranged in an operon that is transcribed from a promoter located in the 178bp upstream of the Rv2626c gene. Using the BACTH system it was found that both Rv2626 and Rv2625 proteins interact with themselves to form homodimers. Additionally, a Rv2625c knock out M. tuberculosis strain was constructed, which also showed a significant decrease in Rv2624c expression. Contrary to expectations, in vitro growth of the mutant strain was similar to that of wild type strain during vegetative growth, oxidative stress and treatment with low doses of nitric oxide, indicating that these genes are not involved in the protective responses to the tested stress conditions.
- português
Os genes Rv2626c, Rv2625c e Rv2624c do patógeno humano Mycobacterium tuberculosis pertencem ao regulon de persistência ou DosR (DevR regulon), e sua expressão se incrementa de maneira significativa em diferentes condições associadas a persistência. Neste trabalho se realizou a análise transcricional da região Rv2626c-Rv2624c por RT-PCR convencional e fusões ao gene gfp. Os dados sugerem que estes genes estão organizados em um operon que se transcreve a partir de um promotor localizado nas 178pb que precedem à sequência codificante do gene Rv2626c. Usando o sistema BACTH se observou que as proteínas Rv2626 e Rv2625 interagem com elas mesmas formando homodímeros. Adicionalmente, foi construí- da uma cepa mutante de M. tuberculosis que carece do gene Rv2625c, a qual também mostrou uma diminuição significativa na expressão de Rv2624c. Contrariamente ao esperado, o crescimento in vitro das cepas mutante e silvestre foi igual durante o crescimento vegetativo, estresse oxidativo e tratamento com doses baixas de óxido nítrico, o que indica que estes genes não estão envolvidos na resposta protetora às condições de estresse ensaiadas.
