Avaliação de protocolos para extração de DNA Genômico de sangue Bovino

• Autores: Bruno do Amaral Crispim, Nascimento André Vieira, Romero Ândrea Renata da Silva, Fernandes Juliana dos Santos, Banari Alexandre Campos, Seno Leonardo de Oliveira, Crisolia Alexéia Barufatti
• Localización: Journal of the Selva Andina Research Society, ISSN-e 2072-9294, Vol. 7, Nº. 2, 2016 (Ejemplar dedicado a: Publicado - Agosto 2016), págs. 95-103
• Idioma: español
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• Resumen

  • Estudos básicos sobre técnicas de extração de DNA são de extrema importância para o sucesso de trabalhos científicos no campo da biologia molecular. A extração e a purificação de ácidos nucleicos constituem etapas fundamentais para o estabelecimento de posteriores análises genéticas. Objetivou-se neste trabalho avaliar a eficácia de diferentes protocolos de extração de DNA por meio da determinação de quantidade, qualidade e a possibilidade de amplificação por meio de PCR do material genético extraído. Utilizou-se amostras de sangue de dez animais, que foram submetidas à extração de DNA e, logo após à reação em cadeia pela polimerase (PCR). Os resultados das análises obtidas por nanofotometria indicaram que a quantidade e a qualidade do DNA genômico foram consideradas satisfatórias, em todos os protocolos, para a realização da PCR, mas houve diferença estatística significativa entre os parâmetros analisados, tanto na quantidade quanto na qualidade (p < 0.05) do DNA obtido. O protocolo de extração utilizando sangue total foi mais eficiente quanto ao tempo e a qualidade do DNA extraído, entretanto em todos os processos de extração houve ausência de degradação. Também foi demonstrado a possibilidade de amplificação da região do exon 2 do gene da leptina de bovinos no DNA extraído.