Se evaluó la colonización in vitro y la actividad enzimática extracelular (xilanolítica y celulolítica) de los hongos ruminales Neocallimastix frontalis H10001 y Orpinomyces intercalaris H20013 sobre hojas de las gramíneas Brachiaria decumbens y Pennisetum clandestinum. Para promover la colonización y actividad enzimática se utilizaron tres niveles de sulfato de sodio (0%, 4% y 12% p/v). La colonización se evaluó determinando el número de esporangios·mm–2 y la actividad enzimática se evaluó en el sobrenadante a las 72 h por cuantificación de los azúcares reductores liberados durante el proceso. El número de esporangios varió (P < 0,05) con la interacción tipo de gramínea × nivel de azufre. Para N. frontalis la adición de S incrementó el número de esporangios excepto para N. frontalis sobre B. decumbens (P < 0,05); mientras que para O. intercalaris la adición de S incrementó el número de esporangios en ambas gramíneas (P < 0,05). El mayor número de esporangios se obtuvo con O. intercalaris sobre P. clandestinum en las concentraciones de 4 y 12% de S (12,77 y 14,82 esporangios·mm–2, respectivamente). La actividad xilanolítica extracelular varío (P < 0,05) con el tipo de gramínea; la mayor actividad xilanolítica extracelular se determinó en el sobrenadante de O. intercalaris sobre B. decumbens. La actividad celulolítica extracelular varió (P < 0,05) con la interacción tipo de gramínea × nivel de azufre. La utilización de 4% de S incrementó (P < 0,05) la actividad celulolítica extracelular de los sobrenadantes de N. frontalis y O. intercalaris en ambas gramíneas; mientras que la adición de 12% de S no afectó (P > 0,05) la actividad celulolítica de N. frontalis sobre P. clandestinum y de O. intercalaris sobre B. decumbens en comparación con el control; no obstante, la actividad celulolítica extracelular en los sobrenadantes de N. frontalis sobre B. decumbens y de O. intercalaris sobre P. clandestinum se redujeron (P < 0,05). Los resultados de este estudio indican que el número de esporangios y la actividad celulolítica extracelular de cultivos puros de los hongos N. frontalis y O. intercalaris dependen del tipo de gramínea y del nivel de S presente en el medio de cultivo; así mismo, la presencia de S mejora el crecimiento y desarrollo de los hongos.
The study was aimed at evaluating in vitro fungal colonization and specific enzyme acti-vity (xylanase and cellulase) of Neocallimastix frontalis H10001 and Orpinomyces intercalaris H20013 rumen fungi on Brachiaria decumbens andPennisetum clandestinum leaves. Three sodium sulphate levels (0%, 4% and 12% w/v) were used for testing in vitrofungal colonization and enzyme activity. Colonization was evaluated by quantifying the number of sporangia on leaf fragments. Enzyme activity was determined by measuring the amount of reduced sugar on supernatant fraction. Type × grass and sulphur interaction levels (P < 0.05) affect sporangial number. The sporangial number for N. frontalisincreased (P < 0.05) when S was added, except for N. frontalis on B. decumbens, whilst adding S increased (P < 0.05) O. intercalaris sporangial number in both grasses. The highest sporangial numbers were detected on O. intercalaris and P. clandestinum at 4% and 12% S (12.77 and 14.82 sporangia·mm–2, respectively). Extracellular xylanolytic activity was affected (P < 0.05) by grass type. The highest extracellular xylanolytic activity was detected inO. intercalaris supernatant on B. decumbens. Extracellular cellulolytic activity was affected (P < 0.05) by type × grass sulphur interaction levels. Adding 4% S increased (P < 0.05) extracellular cellulolytic activity in N. frontalis and O. intercalaris supernatants in both grasses; there were no effects on extracellular cellulolytic activity from N. frontalissupernatant on P. clandestinum and O. intercalaris supernatant on B. decumbens compared to control. Extracellular cellulolytic activity was reduced (P < 0.05) in N. frontalis on B. decumbens and O. intercalaris on P. clandestinum. Variation in sporangial number and of pure rumen fungi culture (N. frontalis and O. intercalaris) extracellular cellulolytic acti vity depended on grass type as well as culture medium S level. S could improve rumen fungi growth and development.
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