Resumen de Fijación de la enzima acetilcolinesterasa (ACHE) en una matriz de poli(alcohol vinílico) (pva) utilizando benzoato de sodio como agente entrecruzante

Kevin Quesada Montero, Karla Ramírez Sánchez, Ricardo Starbird Pérez

• español

  En el presente trabajo se establece un protocolo para la inmovilización de la enzima acetilcolinesterasa (AChE), el cual puede ser utilizado para integrar dicho elemento biológico a un electrodo para la medición de pesticidas. Se evalúa una metodología para la fijación de la enzima en una matriz de poli(alcohol vinílico) (PVA), utilizando benzoato de sodio como agente entrecruzante. Esto se llevó a cabo por medio de la caracterización del proceso de entrecruzamiento del PVA, al irradiar con luz ultravioleta películas de este polímero a 5, 15, 30, 60, y 120 segundos. La formación de la matriz se evidenció por medio de técnicas como FTIR, DSC y TGA. De igual forma, se evaluó la actividad enzimática de la enzima AChE soluble y atrapada en la matriz de PVA, por medio del valor de la velocidad inicial de reacción. Se estableció que el tiempo óptimo de entrecruzamiento del PVA es de 60 segundos de exposición a luz ultravioleta. Se evidencia actividad enzimática de la AChE atrapada en la matriz de PVA.

• English

  In this work, we have established a methodology for the immobilization of the acetyl cholin esterase (AChE) enzyme, which could be used for the development of biosensors to measure pesticides. It is evaluated a methodology to fix the acetyl cholin esterase (AChE) enzyme in a polyvinyl alcohol (PVA) matrix, using sodium benzoate as crosslinking agent. This was reached by irradiating PVA films for 5, 15, 30, 60, and 120 seconds with UV light and quantifying the crosslinking process. The matrix formation was studied using techniques as FITR, DSC and TGA. Moreover, the enzymatic activity of the soluble and trapped AChE enzyme was measured using the value of the initial reaction rate. The optimal time of crosslinking the PVA was found within 60 seconds of exposure to UV light. The enzymatic activity of the AChE trapped in the PVA matrix was verified.