Resumen de Aislamiento de péptidos inhibidores de bacterias a partir de bacterias ácido lácticas del tracto digestivo del lechón e identificación mediante prueba proteómica

Héctor Sánchez, Gloria Ochoa, Carmen Rojas Padilla, Tessy Peralta, Alberto Ordinola

• español

  En la alimentación porcina se usan antibióticos los cuales son un riesgo latente para la salud animal y pública. Los microorganismos son adquiridos del entorno durante las diferentes etapas de su vida, algunas bacterias que colonizan y logran ser parte de la flora natural digestiva ejercen acción antibiótica (sustancias extracelulares llamadas bacteriocinas), las cuales se obtuvieron de sustancias extracelulares de ocho bacterias ácido lácticas (BAL) nativas aisladas de dos lechones (Sus scrofa domesticus); las BAL se identificaron mediante pruebas bioquímicas y pruebas de antagonismo frente a Escherichia fergunsonii y Shigella sannei. La identificación molecular de las bacterias y la sustancia proteica se realizó mediante proteómica, por el método Q proteome™ (método de extracción de la proteína directamente del cultivo de bacterias) donde inicialmente se realizó la digestión bacteriana con el Kit, los productos se sometieron a migraciones, en el gel de policrilamida, seleccionando aquellas de 5 a 2500 KD cortados del gel y una segunda digestión con método convencional con tripsina. Los productos fueron analizados mediante espectrometría de masas en Maldi TOF TOF, obteniendo fragmentos de péptidos que fueron comparados molecularmente a organismo pertenecientes al género Bacillus y luego con Lactobacillus, donde se encontró dos péptidos, llamado ornithine monooxygenase (Bacillus firmus) y RNase J family beta-CASP ribonuclease (Lactobacillus saerimneri) péptidos que tienen efecto inhibidor de bacterias, antimicrobiano que pueden ser bacteriocinas.

• English

  In pig feed antibiotics are used which are a latent risk to animal and public health. Microorganisms are acquired from the environment during different stages of life, some bacteria that colonize and become part of the natural digestive flora and exert antibiotic action (extracellular substances called bacteriocins), Extracellular substances of eight lactic acid bacteria native to the digestive tract (Sus scrofa domesticus) were isolated from two post weaned piglets; BALs were identified by biochemical tests and tests of antagonism against Echerichia fergunsonii and Shigella sannei. The molecular identification of the bacteria and the protein substance was performed proteomically mediated by the Q proteome ™ method (method of extraction of the protein directly from the culture of bacteria) where the bacterial digestion was initially performed with the Kit, the products were subjected to Migrations in the polycrylamide gel, selecting those of 5 and 2500 KD cut from the gel and a second digestion with conventional trypsin method. The products were analyzed by mass spectrometry in Maldi TOF TOF, obtaining fragments of peptides that were molecularly compared to organisms belonging to Bacillos and later with genus Lactobacilli, where two peptides named ornithine monooxygenase (Bacillus firmus) and RNase J family Beta-CASP ribonuclease (Lactobacillus saerimneri) peptides that have antimicrobial, inhibitory effect of bacteria that can be bacteriocins.