Expresión de los genes de mucinas MUC13, MUC15, MUC16 y MUC17 en el epitelio conjuntival normal humano in vivo

• Autores: R. M. Corrales, David Galarreta Mira, José María Herreras Cantalapiedra, Margarita Calonge Cano, F. J. Chaves
• Localización: Archivos de la Sociedad Española de Oftalmologia, ISSN 0365-6691, Vol. 78, Nº. 7, 2003, págs. 375-381
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Normal human conjunctival epithelium expresses MUC13, MUC15, MUC16 and MUC17 mucin genes
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    Objetivo: La superficie ocular expresa al menos cinco de los 17 genes de mucinas descritos hasta ahora. El presente estudio fue diseñado para determinar el perfil de expresión de los genes de mucinas en muestras obtenidas mediante citología por impresión conjuntival (CIC) de sujetos sanos. Métodos: Se aplicaron dos filtros de polietersulfona en la conjuntiva superior de ambos ojos de 8 voluntarios sanos. Posteriormente, se llevó a cabo la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) usando el ARN total extraído y retrotranscrito de las muestras de CIC, para posteriormente estudiar la expresión de todos los genes humanos de mucinas conocidos. Después de la amplificación, los productos de la PCR fueron sometidos a electroforesis en un gel de agarosa al 1,5% y teñidos con bromuro de etidio para confirmar la obtención de una única banda cuando los ADNc son amplificados con los adecuados oligonucleótidos. Resultados: Se detectaron los transcritos de los genes de mucinas conjuntivales publicados anteriormente MUC1, MUC2, MUC4, MUC5AC y MUC7 en todas las muestras. Además, también se detectaron los transcritos de los genes de mucinas MUC13, MUC15, MUC16 y MUC17. Los productos amplificados mediante PCR convencional mostraron el tamaño de amplificación esperado. No se detectaron transcritos de los genes de mucinas MUC3A, MUC3B, MUC5B, MUC6, MUC8, MUC11 y MUC12. Conclusión: Por primera vez, se ha demostrado la expresión de cuatro ARNm de mucinas (MUC13, MUC15, MUC16 y MUC17) en el epitelio conjuntival humano de voluntarios sanos, hecho aún inédito. La función de estos genes habrá de ser estudiada posteriormente.

  • English

    Purpose: The ocular surface epithelia express at least five mucin genes of the total of 17 human mucin genes that have been identified so far. This study was designed to determine the expression profile of mucin genes in conjunctival impression cytology (CIC) samples from healthy subjects. Methods: Two polyethersulfone filters were applied to the superior conjunctiva of both eyes from eight healthy donors. Polymerase chain reaction (PCR) was performed using isolated and retrotranscripted total RNA obtained from the CIC samples to study the expression of all known human mucin genes. Following amplification, PCR products were electrophoresed on 1.5% agarose gel and stained with ethidium bromide to confirm that only a single band was obtained when amplifying all cDNAs with the convenient primers. Results: Transcripts of the previously reported conjunctival mucin genes MUC1, MUC2, MUC4, MUC5AC, and MUC7 were detected in all samples. In addition, transcripts of MUC13, MUC15, MUC16 and MUC17 mucin genes also were detected. Amplified products by conventional PCR showed the expected amplicon size. Transcripts of MUC3A, MUC3B, MUC5B, MUC6, MUC8, MUC11, and MUC12 mucin genes were not detected. Conclusion: The expression of four additional mucin mRNA (MUC13, MUC15, MUC16, and MUC17) has been proved in human conjunctival epithelium from healthy donors for the first time. The function of these genes remains to be further elucidated.