Resumen de ELISA Cualitativo de IgA anti-Lipopolisacárido de Vibrio cholerae en Saliva de Humanos

Carlos Taboada, Gustavo Bracho, Judith del Campo, Rolando Ochoa, Miriam Lastre, Miriam Díaz, Oliver Pérez Martín

• español

  Se estandarizó un ELISA para detectar, en saliva, IgA contra el lipopolisacárido, principal antígeno protectogénico de Vibrio cholerae. Los voluntarios fueron inoculados por vía oral con dosis de 0, 107, 108, 109 unidades formadoras de colonias (ufc) del candidato vacunal El Tor Ogawa, cepa 638.

  Las muestras de saliva fueron tomadas seriadamente, a los 0, 7, 8, 9, 10 y 14 días postinoculación.

  Se consideró seroconversión si las densidades ópticas eran superiores al nivel de corte y si los incrementos en cualquier tiempo después de la inoculación duplicaban los valores iniciales. Los resultados del ELISA en saliva se compararon con: el ELISPOT, el Vobriocida y además con los grupos experimentales. Se obtuvieron sensibilidades de 90.3, 92.85 y 93.3%;

  especificidades de 86.9, 89.5 y 96.0%; 96.0%, valores predictivos positivos de 95.0, 96.2 y 98.2%, 98.2%; valores predictivos negativos de 77.0, 79.2 y 85.7% y eficiencias de 89.4, 90.2 y 94.1% , respectivamente. Se demostró la presencia de IgA anti LPS en saliva de los individuos inoculados con el candidato vacunal, así como una mayor concentración con el inoculo (109 ufc) y se obtuvo la máxima positividad a los 9 días.

• English

  An ELISA technique for IgA antibodies again V. cholerae lipopolisaccharide (LPS) in saliva was standardized. Humans volunteers were orally immunized with 0, 107, 108, 109 colony forming units of the candidate vaccine strain 638, El Tor Ogawa. Saliva samples were collected at 0, 7, 8, 9, 10 and 14 days after oral administration. Seroconversion was considered if IgA titers determined by optical density were higher than the cutoff value and if a two-fold increase of the initial titer was found. The technique was compared to the ELISPOT and to the Vibriocidal Antibody Assay and also the results obtained were compared to the experimental groups showing sensitivity of 90.3, 92.85, 93.3%; specificity of 86.9, 89.5, 96.0%; positive predictive value of 95.0, 96.2, 98.2%;

  negative predictive value of 77.0 y 79.2, 85.7% and efficiency of 89.4, 90.2, 94.1% respectively.

  The presence of specific IgA against LPS in saliva was demonstrated after immunization with the vaccine candidate. The results showed a kinetic profile with a maximum of IgA titter at day 9 post immunization with the highest frequency of positive titers found in the group immunized with 109 cfu.