Las β-lactamasas de espectro expandido (BLEE) son enzimas capaces de hidrolizar el enlace amida cíclico de los oximino-β-lactámicos (cefotaxime, ceftazidime y aztreonam). Son codificadas en megaplásmidos de más de 80 Kda, que generalmente poseen otros genes de resistencia antimicrobiana. Recientemente se han descrito otras estructuras genéticas, denominadas integrones, mediante las cuales diversos genes pueden ser almacenados y diseminados entre especies. Poseen la información genética necesaria para expresar una proteína (integrasa) implicada en la captura y escinsión de genes de resistencia antimicrobiana. En esta investigación se detectaron integrones clase 1 en Enterobacterias productoras de BLEE. Se estudió una muestra de 51 Enterobacterias aisladas de siete centros hospitalarios de Caracas. Se realizó la detección fenotípica y molecular de BLEE. Seguidamente se transfirieron plásmidos mediante conjugación en medio sólido y se aislaron plásmidos de cepas donantes y transconjugantes. Por último, se detectaron integrones clase 1 mediante PCR, utilizando iniciadores para la integrasa clase 1. El 68.6% de las cepas presentan BLEE tipo SHV, un 15.7% tipo CTX-M grupo-2 y 7.8% portan ambos tipos de BLEE. De 36 cepas conjugadas, un 81% transfirió plásmidos portadores de genes que codifican BLEE. El análisis de los aislamientos plasmídicos, mostró en todas las cepas transconjugantes una banda de 25.000 pb y en un 80% se evidenció una banda plasmídica mayor a 50.000 pb. El 27,5% (14) de cepas donantes y sus respectivas transconjugantes son portadoras de integrones clase 1 asociados a plásmidos conjugativos. El 32.4% de las cepas con integrones producen BLEE tipo SHV mientras que el 44.4% BLEE CTX-M
The extended-spectrum--lactamases (ESLs) are enzimes that can hidrolize the amide ciclic bond of the oxyminos--lactamics (cefotaxime, ceftazidime and aztreonam). These are encoded in megaplasmids of more than 80 kDa, that generally posees others genes of antimicrobial resistance. Recently, there have been described another genetic structures, called integrons, through which different genes can be stored and disseminated between strains. They posees the genetic information requiered to express a protein (integrase), implied in the capture and storing of antimicrobial resistance genes. In this investigation we detected class 1 integrons in Enterobacterias that produce ESLs. We studied a sample of 51 Enterobacterias isolated from seven hospitals of Caracas-Venezuela. The fenotipic and molecular detection of ESLs was realized, in the following, plasmids were transfered by conjugation in a solid media and isolated from donor and transconjugant strains. Finally class 1 integrons were detected by PCR, employing primers for the class 1 integrase. The 68.6% of the strains present ESLs type SHV, 15.7% type CTX-M-group 2, and 7.8% carry both types of ESLs. From 36 conjugated strains, 81% transfered plasmids carriers of genes that coded ESLs. The analysis of the plasmidic isolates, showed in all the transconjugant strains, a band of 25.000 pb and in a 80% a plasmidic band larger than 50.000 pb was observed. The 27.5% (14) of donor strains and their respective transconjugants are carriers of class 1 integrons asociated to conjugative plasmids. The 32.4% of the strains with integrons produce ESLs type SHV, instead the 44.4% produce ESLs type CTX-M.
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