Caracterización de la actividad amilásica presente en extractos larvarios de dos polillas plagas de la papa: Tecia solanivora y Symmetrischema tangolias

• Autores: Patricia Mora Criollo, Andrea Rodríguez Guerra, Carlos Soria
• Localización: Revista Ecuatoriana de Medicina y Ciencias Biológicas: REMCB, ISSN-e 2477-9148, ISSN 2477-9113, Vol. 34, Nº. 1-2, 2013, págs. 113-127
• Idioma: español
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    Las polillas Tecia solanivora y Symmetrischema tangolias (Lepidoptera: Gelechiidae) ocasionan daños significativos a los tubérculos de Solanum tuberosum. El objetivo de este estudio fue aislar y caracterizar bioquímicamente las amilasas presentes en los diferentes estadios larvales de estas polillas. Para efectos comparativos se extrajo las proteínas solubles de estadios larvales criados en el laboratorio para determinar espectrofotométricamente diferencias en la concentración de cada extracto. Se calculó el peso promedio de cada larva: T. solanivora resultó ser más pesada y de ella se obtuvo más proteína soluble en comparación con S. tangolias. La actividad amilásica en los extractos proteicos fue identificada mediante degradación de almidones. Extractos de los estadios IV de ambas polillas, incubados a diferentes intervalos de tiempo, presentaron actividades amilásicas diferentes, aunque resultaron bastante similares cuando se leyeron los resultados de cada extracto tarde a las 72 h. Mediante electroforesis de los extractos proteicos de las larvas de las dos especies, migraron alrededor de 11 bandas proteicas entre 225 y 10 kDa. Entre estas bandas, las amilasas fueron reconocidas en ambas especies y en los 4 estadios como bandas de 50 kDa. La(s) banda(s) probablemente isofórmicas de esta enzima aparecieron muy definidas en los estadios I y II, en contraste con las formas difusas encontradas en los estadios III y IV. La actividad amilásica no estuvo ligada a las concentraciones proteicas sino a las condiciones de reacción. El estudio sugiere la posibilidad de diseñar formas inéditas de biocontrol contra estas plagas.

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    Tecia solanivora and Symmetrischema tangolias (Lepidoptera: Gelechiidae) moths cause serious damage to Solanum tuberosum tubercles. The purpose of this study was to isolate and biochemically characterize amilases present in different larval moth stages. Soluble proteins were extracted from the larval stages raised in the laboratory. Differences in protein concentration were determined by spectrophotometry. Average weight for each larvae was calculated. T. solanivora was heavier and more soluble protein was extracted as compared with S. tangolias. Amilase activity of the different protein extracts was identified using starch degradation techniques. The amylasic activity of the IV stage of T. solanivora and S. tangolias incubated at different intervals of time were found to react different, however the results became similar when the activity of both extracts was scored after 72 h time reaction. Eleven protein bands between 225 and 10 kDa were identified electrophoretically. Among these bands, amylases were identified in both species in the 4 different stages in accordance to the molecular weights equivalent to 50 kDa. The protein bands of this enzyme were more defined in the I and II than in the III and IV stages, where they appeared quite diffused. Amylase activity was not linked to soluble protein concentrations; instead, it depended on reaction conditions. These results suggest the possibility of designing new forms of biocontrol against potato moths