Establecimiento de cultivo, eficiencia de formación de colonias y proliferación celular de las células Mesenquimales de la pulpa dentaria humana

• Camejo Suárez, Ma. V. ^[1] ; Merentes Díaz, E. ^[1]
  1. [1] Universidad Central de Venezuela

     Universidad Central de Venezuela

     Venezuela

     
• Localización: Acta odontológica venezolana, ISSN 0001-6365, Vol. 51, Nº. 4, 2013, págs. 7-8
• Idioma: español
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    Las células madre han generado gran interés por su potencial en la medicina regenerativa. El objetivo de esta investigación fue establecer el cultivo de células mesenquimales de la pulpa dentaria humana, identificar células madre mesenquimales en las poblaciones de células aisladas a través del análisis inmunocitoquímico y analizar la cinética de crecimiento de 7 líneas celulares. Las células mesenquimales de pulpa dentaria fueron aisladas de terceros molares retenidos de pacientes entre 15 y 19 años, con técnica de disgregación enzimática y cultivadas en medio DMEM-F12, suplementado con 15% de SFB, 100 ?M L-ácido ascórbico 2-fosfato, 2 mM L-glutamina y antibiótico-antimicótico. Las pruebas inmunocitoquímicas mostraron la existencia de células mesenquimales STRO-1+, CD146 + y CD45 - , lo que indica la presencia de células madre en las poblaciones aisladas. Las células aisladas además mostraron capacidad de autorrenovación y eficiencia de formación de colonias. El análisis de la proliferación celular mostró alta proliferación en algunas líneas celulares y diferencia estadísticamente significativas entre ellas. El conocimiento del comportamiento in vitro, de estas células es necesario para su futura utilización en la regenerativa de tejido.

  • English

    Stem cells have generated great interest for their potential in regenerative medicine. The objective of this study was to establish the mesenchymal cell culture of human dental pulp, identify mesenchymal stem cells in cell populations isolated by immunocytochemical analysis and analyze the kinetics of growth of cell lines 7 cells human dental pulp mesenchymal. The dental pulp mesenchymal cells were isolated from third molars of patients between 15 and 19 years, with enzymatic digestion technique and cultured in DMEM-F12, supplemented with 15% FBS, 100 mML-ascorbic acid 2-phosphate, 2mM L-glutamine, 100 / mL penicillin, 100ug/ ml streptomycin and 2 mg/ mL amphotericin B. Cells were observed daily under microscope. Tests showed inmunocytochemical cell populations in the presence of isolated mesenchymal cells STRO-1 +, CD146 + and CD45 -, which showed the presence of stem cell populations isolated. The isolated cells showed self-renewal capacity and efficiency of colony formation. The cell proliferation assay showed high proliferation in certain cell lines and statistically significant difference between them.