Extraction and purification of B-phycoerythrin from the red microalga Rhodosorus marinus

• GA Básaca-Loya ^[1] ; MA Valdez ^[1] ; EA Enríquez-Guevara ^[1] ; LE Gutiérrez-Millán ^[1] ; MG Burboa ^[1]
  1. [1] Universidad de Sonora

     Universidad de Sonora

     México

     
• Localización: Ciencias marinas, ISSN 0185-3880, ISSN-e 2395-9053, Vol. 35, Nº 4, 2009, págs. 359-368
• Idioma: inglés
• Títulos paralelos:
  • Extracción y purificación de B-ficoeritrina de la microalga roja Rhodosorus marinus
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  • español

    En este trabajo se describe la purificación de la proteína B-ficoeritrina (B-PE) de la microalga roja Rhodosorus marinus. Inicialmente se extrajeron las ficobiliproteínas de las células microalgales mediante fragmentación manual y sonicación. La B-PE fue purificada mediante precipitación con sulfato de amonio y cromatografía de exclusión por tamaño e intercambio aniónico. Se determinó la pureza de B-PE por medio de índices y electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio. La caracterización espectroscópica de B-PE se realizó mediante espectroscopía UV-visible, espectroscopía de fluorescencia y dicroísmo circular. Rhodosorus marinus presentó tres tipos de ficobiliproteínas: ficoeritrina, ficocianina y aloficocianina. La B-PE purificada mostró un índice de pureza (A545/A280) de 4.8, picos característicos a 540 y 562 nm con un hombro a 498 nm, un máximo de emisión de fluorescencia de 578 nm, y una estructura secundaria casi estable ante cambios de pH. La B-PE mostró ser el pigmento predominante en R. marinus. Esta microalga roja podría ser una opción viable para la recuperación de esta cromoproteína.

  • English

    A description is given of the purification of B-phycoerythrin (B-PE) from the red microalga Rhodosorus marinus. Initially, phycobiliproteins were released from the microalgal cells by manual cellular fragmentation and sonication. B-PE was extracted with ammonium sulfate precipitation, and purified by anionic and size exclusion chromatography. Its purity was tested using indexes and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. Spectroscopic characterization of B-PE was performed by UV-visible spectroscopy, fluorescence spectroscopy, and circular dichroism. Rhodosorus marinus showed three types of phycobiliproteins: phycoerythrin, phycocyanin, and allophycocyanin. The purified B-PE showed a purity ratio (A545/A280) of 4.8, characteristic peaks at 540 and 562 nm with a shoulder at 498 nm, fluorescence emission maximum at 578 nm, and a secondary structure almost stable with pH changes. B-PE was found to be the predominant pigment in R. marinus and this red microalga could be a viable option for the recovery of this chromoprotein.