Aislamiento, cultivo y diferenciación in vitro de células madre mesenquimales adultas de pulpa dentaria humana

• Camejo Suárez, Ma. V. ^[1] ; Merentes Díaz, E. ^[1] ; Payares Trujillo, G. ^[1] ; Márquez, Ma. L. ^[1] ; Espinoza Aliso, M. ^[1]
  1. [1] Universidad Central de Venezuela

     Universidad Central de Venezuela

     Venezuela

     
• Localización: Acta odontológica venezolana, ISSN 0001-6365, Vol. 53, Nº. 1, 2015, págs. 1-2
• Idioma: español
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  • español

    Las células madre adultas tienen un gran potencial, para ser utilizadas en la terapia celular y la ingeniería de tejidos. El objetivo de este estudio fue establecer el cultivo de células madre mesenquimales adultas de la pulpa dentaria humana y determinar la capacidad de diferenciación, in vitro, hacia múltiples linajes con la utilización de medios inductores. Pulpas de 50 terceros molares retenidos, de 24 pacientes de 15 a 24 años, fueron removidas y procesadas. Para aislar las células, se utilizó el método de disgregación enzimática. Fueron cultivadas en medio DMEM-F12 (del inglés Medio Eagle´s Modificado por Dulbecco´s) suplementado con 15% de SFB, 100 ?M L-ácido ascórbico 2-fosfato, 2 mM L-glutamina y antibióticos-antimicótico. Se establecieron 8 líneas celulares de 8 pacientes diferentes. Las células fueron observadas diariamente. Se evaluó la morfología, la eficiencia de formación de colonias y la proliferación celular. Se indujo a la diferenciación odontogénica-osteogénica, condrogénica y adipogénica. Las células mesenquimales de pulpa dentaria aisladas, formaron colonias y la mayoría presentó una morfología típica de fibroblasto. Las células expresaron marcadores de células madre STRO-1, CD146 y no expresaron CD45 marcador específico de células hematopoyéticas. Mostraron capacidad de autorrenovación, eficiencia de formación de colonias y alta proliferación. Además fueron capaces de diferenciarse en múltiples linajes. En el presente trabajo de investigación se aislaron células mesenquimales de pulpa dentaria humana con características de células madre mesenquimales

  • English

    Adult stem cells have great potential, to be used in cell therapy and tissue engineering. The objective of this study was to establish culture of adult mesenchymal stem cells of the human dental pulp and determine the capacity of differentiation, in vitro, toward multiple lineages with the use of inductors media. Pulps of 50 impacted third molars, of 24 patients from 15 to 24 years, were removed and processed. To isolate the cells, we used the method of enzyme digestion. They were cultured in DMEM-F12 medium supplemented with 15% FBS, 100 ?m L-ascorbic acid 2-phosphate, 2 mm L-glutamine and antibiotic-antimycotic. Established 8 cell lines from 8 different patients. The cells were observed daily. We assessed the morphology, the efficiency of colony formation and cell proliferation. Was induced to odontogenic -osteogenic, chondrogenic and adipogenic differentiation . The mesenchymal cells isolated dental pulp, formed colonies and most presented a morphology typical of fibroblast. The cells expressed markers of stem cells STRO-1, CD146 and did not express CD45 specific marker for hematopoietic cells. Showed capacity of self renewal, efficiency of colony formation and high proliferation. In addition, they were able to differentiate into multiple lineages. In the present investigation were isolated mesenchymal cells of human dental pulp with characteristics of mesenchymal stem cells.