Detección de actividad fosfatasa ácida a partir de callos embriogénicos y no embriogénifigcos de caña de azúcar

• Ana Karina Marcano ^[1] ; Elizabeth Valdivieso ^[1] ; Maira Oropeza C. ^[1]
  1. [1] Instituto de Biologia Experimental Tecnológica

     Instituto de Biologia Experimental Tecnológica

     Oeiras e São Julião da Barra, Portugal

     
• Localización: Agronomía Tropical, ISSN 0002-192X, Vol. 56, Nº. 4, 2006
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Determination of acid phosphatase activity from embryogenic and non embryogenic sugarcane (saccharum sp.) calluses
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    Uno de los sistemas de propagación in vitro más utilizado en el cultivo de la caña de azúcar, Saccharum sp., es la embriogénesis somática. Durante este proceso ocurren cambios en la expresión de las proteínas que pueden ser determinados mediante el análisis de patrones isoenzimáticos, permitiendo estos la evaluación temprana de los cultivos embriogénicos antes de que los cambios morfogenéticos se hagan evidentes. En el trabajo se estudió la presencia de la actividad fosfatasa ácida (ACP) a partir de callos embriogénicos (E) y no embriogénicos (NE) de caña de azúcar. Con el fin de detectar esta actividad se realizaron electroforesis en geles de poliacrilamida al 10% en condiciones nativas, incubándose luego el gel en presencia de los sustratos a-naftil fosfato y b-naftil fosfato a pH ácido. Paralelamente, se determinó la misma actividad en ensayos enzimáticos a punto final, con ligeras modificaciones. Los perfiles electroforéticos mostraron una única banda en ambos extractos, no observándose diferencias significativas en la intensidad de las mismas. No obstante, el ensayo enzimático reveló una mayor actividad fosfatasa ácida (1,5 veces) en los extractos de callos E que en los NE. Estos resultados preliminares sugieren que esta actividad podría utilizarse como marcadora de los procesos de diferenciación que ocurren durante el cultivo in vitro.

  • English

    Somatic embryogenesis is one of the in vitro propagation systems used more extensively for sugarcane Saccharum sp., culture. During this process changes in the protein expression patterns are observed and they can be determined using isoenzimatic analysis. This approach allows early evaluation of the embryogenic potential before the morphogenetic changes become evident. In this work, the acid phosphatase activity (PAC) from embryogenic (E) and non embryogenic (NE) calluses of sugarcane was studied. Gel electrophoresis was performed using polyacrylamide 10% gels under native conditions, followed by incubation with a-naftil phosphate and ß-naftil phosphate solutions at acid pH. The same activity was determined on enzymatic assays to end point according to Gottlieb and Dwyer (1981), with some modifications. Electrophoretic profiles showed just one band of the same intensity in each extract. Nevertheless, enzymatic assays revealed a higher acid phosphatase activity (1,5 times) in E callus extracts that in the NE. These preliminary results suggest that acid phosphatase activity could be used as a marker for differentiation processes during in vitro culture.