Resumen de Bandeamento cromossômico e estimativa do conteúdo de dna em dietes bicolor (iridaceae), uma importante espécie ornamental
Aryane Campos Reis, Isabel Teresa Silva Souza, Saulo Marçal de Sousa
- English
The genus Dietes (Iridaceae), is known to present species widely used in ornamentation due to the presence of beautiful flowers of easy cultivation and good adaptation to various types of soil. Although the species are widely used in the landscaping of houses, squares and gardens, little is known about the chromosomal constitution of the species. The aim of present work was to characterize the species Dietes bicolor by base-specific fluorochromes (DAPI/CMA3) banding analysis and to estimate the amount of nuclear DNA by flow cytometry. For this, reference standard leaves (Pisum sativum) were macerated with young leaves of D. bicolor in WPB buffer. The nuclei suspension was filtered through a 40μm mesh and then 30μl of the propidium iodide (1mg / ml) was added. Samples were analyzed in triplicate on the flow cytometer. For cytogenetic analysis, root meristems from seeds were pretreated with 8-hydroxyquinoline solution (0.003M) for 10h and fixed in ethanol and acetic acid (3v: 1v). Cell wall was removed with Pectinase and Cellulase (2:20) solution for 3h at 37°C. Slides were prepared by cellular dissociation technique followed by air drying. Previously analyzed slides were stained with DAPI (specific for AT rich regions) and Chromomycin A3 (specific for CG regions) fluorochromes, in order to detect heterochromatic regions. From the results, it was possible to identify that the species has 2C = 17.93 pg of DNA content.
The karyotype is composed of 2n = 40 chromosomes, with 8 CMA+/DAPI- terminal sites, seven marks located in short arms and one mark located in the long arm. This is the first description of heterochromatin distribution for the species and contributes to a better karyotypic characterization of D. bicolor, an important ornamental species
- português
O gênero Dietes (Iridaceae), descatase por possuir espécies amplamente usadas na ornamentação devido à presença de flores exuberantes de fácil cultivo e boa adaptação a diversos tipos de solos. Embora as espécies sejam bastante utilizadas no paisagismo de casas, praças e jardins, pouco se sabe sobre a constituição cromossômica das espécies. O objetivo do presente trabalho foi caracterizar citogeneticamente a espécie Dietes bicolor por meio de análises de bandeamento com fluorocromos base-específicos (DAPI/CMA3) e estimar a quantidade de DNA nuclear por meio de citometria de fluxo. Para isso, folhas do padrão de referência (Pisum sativum) foram maceradas juntamente com folhas jovens de D. bicolor, em tampão WPB. A suspensão de núcleos resultante foi filtrada em uma malha de 40μm e então foi adicionado 30μL do corante iodeto de propídeo (1mg/ml). As amostras foram analisadas em triplicas no citômetro de fluxo. Para a análise citogenética, meristemas radiculares oriundos de sementes foram pré-tratados com solução bloqueadora 8-hidroxiquinoleína (0,003M) por 10h e fixados em etanol e ácido acético (3:1). A digestão da parede celular foi realizada com solução enzimática Pectinase Celulase (2:20) durante 3h a 37ºC, em seguida lâminas foram confeccionadas por meio da técnica de dissociação celular seguida de secagem ao ar. Lâminas previamente analisadas foram submetidas ao bandeamento com os fluorocromos DAPI (específico para regiões ricas em AT) e Cromomicina A3 (específico para regiões CG), permitindo a identificação de regiões heterocromáticas.
A partir dos resultados, obtidos foi possível identificar que a espécie possui 2C = 17,93 pg de DNA. O cariótipo é composto por 2n = 40 cromossomos, apresentando 8 sítios terminais CMA+/DAPI-, sendo sete marcas localizadas em braços curtos e uma marca localizada no braço Floricultura, Plantas Ornamentais e Cultura de Tecidos de Plantas Capítulo 7 63 longo. Estas informações são inéditas para a espécie e contribuem para uma melhor caracterização cariotípica de D. bicolor, uma importante espécie ornamental.
