Evaluación de la citotoxicidad in vitro de insecticidas organoclorados y metales en la linea celular CHO-K1 usando cuatro métodos alternativos

• Bayoumi, A.E. ; Garcia-Fernandez, A.J. ; Ordonez, C. ^[1] ; Balana-Fouce, R. ^[1] ; Ordonez, D. ^[1]
  1. [1] Universidad de León

     Universidad de León

     León, España

     
• Localización: Revista de toxicología, ISSN 0212-7113, Vol. 15, Nº. 2, 1998, págs. 73-78
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Cytotoxic evaluation of organochlorine insecticides and metals in vitro on CHO-K1 cell line using four different alternative methods
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• Resumen
  • español

    En el presente trabajo se ha evaluado la citotoxi cidad de doce insecticidas organoclorados ysiete metales por medio de 4 métodos alternativos in vitro en la línea celular establecida CHO-K1. Las técnicas utilizadas fueron: el ensa yo de captación de rojo neutro (RN), el ensayo de reducción de MTT, el contenido total de proteínas celulares yel ensayo de liberación de la Iactato deshidrogenasa (LDH) al medio de cultivo. Los resultados de los tres primeros métodos demos traron que lasecuencia de potencia citotoxica para los insec ticidas organoclorados derivados del diclorodifeniletano era:

    pjZ-TDE >p,p'-DDT>p,p'-DDE >metoxicloro. En elcaso de los isómeros del hexaclorociclohexano (HCH) y de los derivados del ciclodieno, los resultados demostraron que la mezcla de isómeros del HCH era más tóxica que suisómero Y(lindano) y que entre los derivados del ciclodieno el orden decitotoxicidad era: clordano > heptacloro > aldrín > endo sulfan > toxafeno. El contenido total de proteínas celulares mostró una mayor sensibilidad para el p,p'-TDE, p,p -DDT, p,p'-DDE, metoxicloro, HCH, lindano y toxafeno. Por el contrario, el test del MTT fue más sensible que los otros ensayos para el aldrín, dieldrín y endosulfan. Por último el RN tuvo mayor sensibilidad que los otros ensayos frente clor dano yheptacloro. De acuerdo con el valor de RN50 yconte nido total de proteínas celulares, lacitotoxicidad delos meta les ensayados presentó el siguiente orden : Hg2+ > Cd2+ > Cu2+ >Zn2+ >C02+ >N¡2+ >Pb2+, mientras que el ensayo del MTT mostró un orden ligeramente distinto Hg2+ > Cd2+ > Zn2+ > Cu2+ > NÍ2+ > Co2+ > Pb2+. El ensayo del MTT fue más sensible que el RN yéste a su vez que el ensayo del con tenido total de proteínas celulares para determinar la citoto xicidad de los cationes metálicos ensayados. Adiferencia de las otras técnicas ensayadas, el método de liberación del LDH no permitió determinar los valores de citotoxicidad en el punto medio para la mayoría de los compuestos anali zados.

  • English

    The cytotoxicity of twelve organochlorine insecticides and seven metals has bene evaluated by four different in vitro alternative methods using the established CHO-K1 cell line as a mammalian model. The assessed techniques represent distant endpoints, neutral red (NR) assay, methyl tetrazolium test (MTT) assay, total cell protein content assay and lactate dehydrogenase (LDH) leakage test. Results of the first three in vitro methods showed that, the sequence of potency for the tested insecticides was p,p'-TDE > p,p'-DDT > p,p'-DDE and/or methoxychlor as a diclorodiphenyethanes derivatives. In case of the hexachlorocyclohexane isomers and cyclodiene derivatives, the results of both NR and total cell protein content assays showed that the mix of isomers of HCH were more toxic than the gamma isomer (lindane), and the derivatives of cyclodiene, displayed the following order of toxicity ranking chlordane > heptachlor > aldrin > endosulfan > toxaphene. The MTT test showed different results in the sequence of potency of the hexachloryclohexane isomers and cyclodiene derivatives. According to NR and total cell protein content assays the toxicity of the tested metals was in the following rank order: Hg2+ > CD2+ > Cu2+ > Zn2+ > Co2+ > Ni2+ > Pb2+, while MTT test exhibited the toxicity ranking as Hg2+ > Cd2+ > Zn2+ > Cu2+ > Ni2+ > Co2+ > Pb2+. Furthermore, the total cell protein content assay had the highest sensitivity, for p,p'-TDE, p,p'-DDT, p,p'-DDE, methoxychlor, HCH, lindane and toxaphene. Conversely, MTT test was more sensitive than the other tests against aldrin, dieldrin and endosulfan, while the NR assay had higher sensitivity than the other tests against chlordane and heptachlor. In case of the tested metals, the sequence of sensitivity between the followed methods was: MTT > NR > protein content assay. According to the LDH leakage test, it could not be reach to the midpoint cytotoxicity value to the majority of the tested agents.