Resumen de Luliconazole: Stability-indicating LC method, structural elucidation of major degradation product by hrms and in silico studies
Douglas Porto, Lisiane Bajerski, Marcelo Donadel Malesuik, Juliano Azeredo, Fávero Paula, Clésio Paim
- español
Objetivo: un nuevo método indicativo de estabilidad por cromatografía líquidafue desarrollado y validado para la determinación cuantitativa de luliconazol. Materialesy métodos: estudios preliminares de degradación forzada demostraron un picoadicional en el mismo tiempo de retención del fármaco. El método desarrollado paraoptimizar las condiciones cromatográficas proporcionó una adecuada resolución(R ≥ 2). El diseño experimental fue evaluado para verificar su robustez y la mejorcondición cromatográfica para validación. Metodología: las soluciones de luliconazolfueron expuestas a diferentes condiciones de estrés para evaluar la indicaciónde estabilidad del método, el aislamiento del producto de degradación formado(DP-1), su identificación y análisis in silico para predecir su ruta de degradación ytoxicidad. El procedimiento se validó por robustez, selectividad, linealidad, precisióny exactitud. Las condiciones cromatográficas incluyeron una columna Phenomenex® RP-18, como fase móvil una mezcla de acetonitrilo y solución 0,3% (v/v) detrietilamina en elución isocrática. Resultados y conclusiones: el método mostró serrobusto, con buena recuperación, precisión, respuesta lineal en el rango de 5,0 a 40,0μg.mL-1 e indicativo de la estabilidad. La condición de estrés alcalina resultó en laformación de DP-1. Estudios por hrms identificaron este producto como un derivadohidroxiacetamida y los estudios in silico no mostraron potencial de toxicidad.
- English
Aim: A new stability-indicating liquid chromatography method was developedand validated for the quantitative determination of luliconazole. Materials andmethods: Preliminary forced degradation study demonstrated an additional peakof the degradation product at the same retention time to the drug, due to this, themethod was developed optimizing the chromatographic conditions to provide sufficientpeak resolution (R ≥ 2). The experimental design was evaluated to assess therobustness and the best chromatographic conditions to be used for the validation.Methodology: Luliconazole solutions were exposed to various stress conditions toevaluate the method indication stability, in which the degradation product (DP-1)formed was isolated, identified, and evaluated in silico to predict degradation pathwayand toxicity. The procedure was validated by robustness, selectivity, linearity, precision,and accuracy. Liquid chromatography was performed in a Phenomenex® RP-18column with a mixture of acetonitrile and 0.3% (v/v) triethylamine solution as amobile phase in isocratic elution. Results and conclusions: The method demonstratedrobustness, good recovery, precision, linear response over a range from 5.0to 40.0 μg.mL-1, and to be stability indicating. The alkaline stress condition resultedin the formation of DP-1. hrms studies identified this product as an hydroxyacetamidederivative, and in silico studies did not show toxic potential.
- português
Objetivo: um novo método indicativo de estabilidade por cromatografia líquidafoi desenvolvido e validado para a determinação quantitativa de luliconazol. Materiaise métodos: estudos preliminares de degradação forçada demonstraram um pico adicional no mesmo tempo de retenção do medicamento. O método desenvolvidopara otimizar as condições cromatográficas proporcionou resolução adequada(R ≥ 2). O delineamento experimental foi avaliado para verificar sua robustez e amelhor condição cromatográfica para validação. Metodologia: soluções de luliconazolforam expostas a diferentes condições de estresse para avaliar a indicação daestabilidade do método, o isolamento do produto de degradação formado (DP-1),sua identificação e análise in silico para predizer sua rota de degradação e toxicidade.O procedimento foi validado quanto à robustez, seletividade, linearidade, precisão eexatidão. As condições cromatográficas incluíram uma coluna Phenomenex® RP-18,como fase móvel uma mistura de acetonitrila e solução de trietilamina 0,3% (v/v)em eluição isocrática. Resultados e conclusões: o método mostrou-se robusto, comboa recuperação, precisão, resposta linear na faixa de 5,0 a 40,0 μg.mL-1 e indicativode estabilidade. A condição de estresse alcalino resultou na formação de DP-1.Os estudos da hrms identificaram este produto como um derivado da hidroxiacetamidae os estudos in silico não mostraram nenhum potencial de toxicidade.
