Carlos Alencastro Pavón, José Ignacio Ayala Colimba
Las bacterias fijadoras de nitrógeno y leguminosas mantienen una relación simbiótica, que les permite obtener nutrientes de manera eficiente, sin embargo, existe escasa información de las características morfológicas y medio de conservación adecuado de las bacterias que nodulan en el sistema radical de la variedad rosada de alverja (Pisum sativum L). El objetivo de esta investigación fue aislar y conservar cepas nativas de Rhizobium sp., a partir de los nódulos radicales del cultivo de arveja, variedad rosada, para lo cual se estableció el cultivo de arveja en campo en el cantón Espejo, provincia del Carchi. Para la obtención de los nódulos en campo, se realizó un muestreo aleatorio en zig – zag de plantas jóvenes y vigorosas en la etapa fenológica de floración. Se tomaron 3 plantas en 5 puntos de muestreo, para un total de 15 plantas del lote. Los nódulos obtenidos se llevaron al laboratorio y se sembraron en Levadura Manitol Agar con Azul de Bromotimol (YMA + AB). Se caracterizó morfológicamente las cepas nativas de Rhizobium y se observó colonias de forma circular, convexas con borde entero y superficie lisa, de color blanca cremosa rosada y consistencia gelatinosa y mediante la tinción de Gram, se reportó bacilos Gram negativos, además, se realizó la caracterización bioquímica, donde se identificó la cepa nativa perteneciente al género Rhizobium, por su reacción positiva a la prueba de Biuret, resistencia a NaCl 2%, e incapacidad de producir H2S, características típicas de cepas de rizobio. Además, un elemento esencial en la identificación fue la falta de absorción del colorante rojo congo. Se conservó la cepa aislada en medio YMA + AB, para luego incubar a 30 °C por 5 días y bajo condiciones de asepsia, se llevó la cepa a una nevera a temperatura de 4 °C, para preservar la integridad genética del microorganismo.
Bactérias fixadoras de nitrogênio e leguminosas mantêm uma relação simbiótica que lhes permite obter nutrientes de forma eficiente, porém, há poucas informações sobre as características morfológicas e meio de conservação adequado das bactérias que nodulam no sistema radicular da variedade rosa de ervilha. (Pisum sativum L.). O objetivo desta pesquisa foi isolar e conservar cepas nativas de Rhizobium sp., Dos nódulos radiculares da cultura da ervilha, uma variedade rosa, para a qual o cultivo de ervilha forrageira foi estabelecido no cantão Espejo, província de Carchi. Para obter os nódulos no campo, foi realizada uma amostragem aleatória em zigue-zague de plantas jovens e vigorosas no estádio fenológico de floração. Foram retiradas 3 plantas em 5 pontos de amostragem, totalizando 15 plantas do lote. Os nódulos obtidos foram levados ao laboratório e plantados em Agar Manitol de Levedura com Azul de Bromotimol (YMA + AB). As cepas nativas de Rhizobium foram caracterizadas morfologicamente, onde foram observadas colônias de forma circular, convexa, com borda inteira e superfície lisa, de coloração branco-rosada cremosa e consistência gelatinosa, e por meio da coloração de Gram, foram relatados bacilos Gram negativos. realizaram a caracterização bioquímica, onde foi possível identificar a cepa nativa de Rhizobium, devido à sua reação positiva ao teste do Biureto, resistência a NaCl 2% e incapacidade de produzir H2S, características típicas de cepas de rizóbio. Além disso, um elemento essencial na identificação foi a falta de absorção do corante vermelho do Congo. A cepa isolada foi preservada em meio YMA + AB, sendo então incubada a 30°C por 5 dias e, sob condições assépticas, a cepa foi colocada em geladeira a temperatura de 4°C, para preservar a integridade genética do microrganismo .
Nitrogen-fixing bacteria and legumes maintain a symbiotic relationship that allows them to obtain nutrients efficiently, however, there is little information on the morphological characteristics and adequate conservation medium of the bacteria that nodulate in the root system of the pink variety of pea. (Pisum sativum L.). The objective of this research was to isolate and conserve native strains of Rhizobium sp., From the root nodules of the pea crop, a pink variety, for which the field pea cultivation was established in the Espejo canton, Carchi province. To obtain the nodules in the field, a random zigzag sampling of young and vigorous plants in the phenological stage of flowering was carried out. 3 plants were taken at 5 sampling points, for a total of 15 plants from the lot. The nodules obtained were taken to the laboratory and planted in Yeast Mannitol Agar with Bromothymol Blue (YMA + AB). The native strains of Rhizobium were morphologically characterized, where colonies of circular, convex shape with entire edge and smooth surface, of a creamy-pink white color and gelatinous consistency were observed, and by means of Gram staining, Gram negative bacilli were reported. carried out the biochemical characterization, where it was possible to identify the native strain of Rhizobium, due to its positive reaction to the Biuret test, resistance to 2% NaCl, and inability to produce H2S, typical characteristics of rhizobia strains. Furthermore, an essential element in the identification was the lack of absorption of the Congo red dye. The isolated strain was preserved in YMA + AB medium, and then incubated at 30 ° C for 5 days and, under aseptic conditions, the strain was placed in a refrigerator at a temperature of 4 ° C, to preserve the genetic integrity of the microorganism.
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