Multiplicación in vitro de Eucalyptus globulus mediante sistema de inmersión temporal

• Ricardo González ^[1] ; Darcy Ríos ^[1] ; Fabiola Avilés ^[1] ; Manuel Sánchez-Olate ^[1]
  1. [1] Universidad de Concepción

     Universidad de Concepción

     Comuna de Concepción, Chile

     
• Localización: Revista Bosque (Valdivia), ISSN-e 0717-9200, ISSN 0304-8799, Vol. 32, Nº. 2, 2011, págs. 147-154
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • In vitro multiplication of Eucalyptus globulus by temporary immersion system
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• Resumen
  • español

    Con el objeto de establecer metodologías de masificación de Eucalyptus globulus se analizaron factores que afectan la multiplicación in vitro de esta especie mediante el sistema de inmersión temporal. Para ello se dispusieron cinco microtallos por frasco, conteniendo 250 mL de medio Murashige y Skoog. Se estudiaron la frecuencia de inmersión (6, 12, 24, 48 h), tiempo de inmersión (1, 2 y 3 min) y concentración de macronutrientes (25, 50, 100 %). También se estudió el efecto de la adición al medio de cultivo de 6-bencilaminopurina (0, 2,2 y 4,4 µM), polivinilpirrolidona (0, 250 y 500 mg L-1) y concentración de sacarosa (43,8 y 87,6 mM). En cada ensayo se realizó un diseño completo aleatorio con arreglo factorial con tres repeticiones. Se evaluó número de brotes nuevos por frasco, razón de masa seca/masa fresca, pH final del medio de cultivo y porcentaje de brotes hiperhidratados. El tratamiento que presentó una mayor generación de brotes y menor hiperhidratación fue obtenido con un tiempo de inmersión de dos minutos, frecuencia cada 12 horas, concentración de macronutrientes al 50 %, 43,8 mM de sacarosa, 2,2 µmol de 6-bencilaminopurina y 250 mg L-1 de polivinilpirrolidona. La tasa de multiplicación de microtallos de E. globulus es significativamente mayor al aumentar el tiempo de inmersión de 1 a 2 minutos, así como al suplementar el medio de cultivo con 4,4 µM de 6-bencilaminopurina. Por otra parte, la tasa de multiplicación decae si la frecuencia de inmersión disminuye de ciclos cada 12 h a ciclos cada 48 h. Finalmente, la hiperhidratación de los tejidos aumenta al elevar la concentración de los macronutrientes y sacarosa, sin ser afectada por el nivel de antioxidante agregado al medio.

  • English

    With the object of establishing mass production methods of Eucalyptus globulus, factors affecting its in vitro multiplication stage by temporary immersion were studied. For this, five microshoots per flask containing 250 mL of Murashige and Skoog medium were disposed. Factors such as immersion frequency (6, 12, 24, 48 h), immersion time (1, 2 and 3 min) and macronutrients concentration (25, 50 and 100 %) were studied. In a second stage, the addition into medium of 6-bencylaminopurine (0, 2.2 and 4.4 µM), polyvinylpyrrolidone (0, 250 y 500 mg L-1) and sucrose concentration (43.8 and 87.6 mM) was analyzed. A completely random design with factorial arrangement was used in each stage. Variables evaluated were number of new shoots per flask, dry and fresh weight rate and final pH of culture medium. The best rate of multiplication and less hyperhydration was obtained with immersion time of 2 min, a frequency of 12hours, macronutrients at 50 %, 2.2 µmol of 6-bencylaminopurine, 43.8 mM of sucrose and 250 mg L-1 of polyvinylpyrrolidone. Time and frequency of immersion interaction affects multiplication rate and microshoot hyperhydration. Use of 6-bencylaminopurine (2,2 µM) and polyvinylpyrrolidone (250 mg L-1) increases multiplication rate without influence on microshoot hyperhydration. A reduction on sucrose concentration decreases hyperhydration without affecting formation of new shoots.