Diagnóstico Molecular de la Enfermedad de Chagas mediante Amplificación Isotérmica mediada por asas (LAMP)

• SERGIO QUISPE ^[2] ; BERNARDO TORRICO ^[2] ; PALMIRA GUEVARA ^[1]
  1. [1] Universidad Central de Venezuela

     Universidad Central de Venezuela

     Venezuela

     
  2. [2] UMSA. Carrera de Bioquímica, Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas
• Localización: Con-ciencia: Revista de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, ISSN-e 2710-3609, ISSN 2310-0265, Vol. 2, Nº. 1, 2014, págs. 17-24
• Idioma: español
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    El seguimiento de las infecciones en triatominos es fundamental en la epidemiología de la enfermedad de Chagas. Demostramos la factibilidad de incorporar un nuevo diagnóstico molecular y detectar mediante LAMP, infecciones por T. cruzi y T. rangeli en muestras de contenido intestinal y hemolinfa preservadas en papel de filtro. La Amplificación Isotérmica mediada por asas (LAMP) es un nuevo método de amplificación de ácidos nucléicos que amplifica DNA con una alta especificidad, eficiencia y rapidez bajo condiciones isotérmicas, utilizando cuatro cebadores y DNA polime-rasa con actividad de cadena desplazante. Se ha aplicado un método que acelera la reacción LAMP mediante la utilización de cebadores aceleradores. El método LAMP utilizado en este trabajo produce una reacción en menos tiempo que el método original, esta reacción fue aplicada sobre muestras de Tripanosoma rangely y Tripanosoma cruzy. Regularmente el tiempo de detección es menor a una hora, este nuevo método nos facilita el análisis genético, incluyendo el diagnostico clínico genético en el laboratorio.

  • English

    The monitoring of triatomino infections is a key step in the epidemiology of Chagas disease. We demonstrate the feasibility of incorporating new molecular identification tools, we obtained positive LAMP identification of infections by T. cruzi and T. rangeli in haemoliph and digestive track samples preserved in filter paper. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) is a novel nucleic acid amplification method thatamplifies DNA with high specificity, efficiency and rapidity under isothermal conditions using a set of four specially designed primers and a DNA polymerase with strand displacement activity. We have applied a method that accelerates the LAMP reaction by using additional primers, termed loop primers. The LAMP method presented here uses loop primers to achieve reaction times of less than half that of the original LAMP method, this reaction was applied to samples from Tripanosoma rangely and Tripanosoma cruzy. Since the total time of analysis including detection is less than 1 h, this new method should facilitate genetic analysis, including genetic diagnosis in the clinical laboratory