Resumen de Evaluación de tres sustratos empleados en la prueba de inmunofluorescencia indirecta que mide anticuerpos antimitocondriales para diagnóstico de cirrosis biliar primaria

Patricia Poma Huanca, Luis Fernando Sosa

• español

  La cirrosis biliar primaria (CBP) es una enfermedad hepática inflamatoria crónica de etiología desconocida caracterizada por la destrucción de los conductos biliares intrahepáticos que desencadena una cirrosis hepática. En el presente estudio se evaluó tres sustratos comúnmente empleados para detectar anticuerpos antimitocondriales (AMA) por Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) para el diagnóstico de CBP. Los sustratos evaluados fueron: corte histológico (riñón de ratón), células Hep-2 (células epiteliales derivadas del carcinoma laríngeo humano) y células BHK-21 (fibroblastos de riñón de hámster dorado de Siria) los cuales fueron comparados con los resultados de la prueba confirmatoria (ensayo inmunoenzimático) comercial que mide anticuerpos anti antígenos M2 mitocondriales (ELISA, Trinity Biotech). Se seleccionaron 25 sueros con resultados positivos para AMA por ELISA (índice > 1,10UI/mL). Los controles negativos eran sueros de pacientes que no tenían antecedentes de enfermedad hepática y presentaban resultados negativos para AMA (índice < a 0,90 UI/mL). De los tres sustratos evaluados, los basados en línea celular BHK-21 mostraron tener utilidad limitada, con valores de eficiencia del 56%, sensibilidad del 48%, especificidad del 64% y un índice de concordancia de Kappa de 0,12 (bajo) con respecto a los resultados de la prueba Gold estándar (ELISA-AMA). Para el sustrato Hep-2 se encontró una concordancia moderada (Kappa= 0,6) frente al Gold estándar, se obtuvo una especificidad =100%, sensibilidad = 60% y eficiencia de 80 % Los cortes histológicos de riñón de ratón mostraron una sensibilidad, especificidad y eficiencia del 92%; además mostraron resultados de mayor concordancia con el método de ELISA (Kappa= 0,84). De los tres métodos de inmunofluorescencia evaluados se determinó que el que usa cortes histológicos de riñón de ratón es el más eficiente y por lo tanto podría ser una herramienta útil como método tamiz en el diagnóstico de CBP.

• English

  Primary biliary cirrhosis (PBC) is a chronic inflammatory liver disease of unknown etiology characterized by the destruction of the intrahepatic bile ducts that triggers liver cirrhosis. In the present study we evaluated three commonly used substrates for mitochondrial antibodies (AMA) by indirect immunofluorescence (IIF) for the diagnosis of PBC. The substrates were evaluated: histological (mouse kidney), Hep-2 cells (epithelial cells derived from human laryngeal carcinoma) and BHK- 21 (hamster kidney fibroblasts Golden Syrian) which were compared with the results of the confirmatory test (enzyme immunoassay) commercial antigens measured M2 mitochondrial antibodies (ELISA, Trinity Biotech). We selected 25 positive sera for AMA by ELISA (index > 1.10 IU / ml). Negative controls sera were from patients who had no history of liver disease and had negative results for AMA (index < 0.90 IU/mL). Of the three substrates tested, the based on BHK -21 cell line were shown to have limited usefulness, efficiency values of 56%, sensitivity 48 %, specificity of 64 % and Kappa concordance index of 0.12 (low) meade on the results of the Standard Gold Test (ELISA -AMA). For Hep-2 was moderate agreement (Kappa = 0.6) versus the Gold standard, we obtained 100% of specificity, sensitivity = 60% and 80% of efficiency. Histological mouse kidney showed a sensitivity, specificity and efficiency of 92 %, results also showed better agreement with the ELISA method (Kappa = 0.84). Of the three methods of immunofluorescence evaluated it was determined that histological mouse kidney is the most efficient substrate and therefore could be useful as a screening test for diagnosing of CBP.