Estandarizacion de un metodo fluorometrico sobre trofozoitos de giardia lamblia

• CLAUDIA CONDO MONTERO ^[1] ; EFRAÍN SALAMANCA CAPUSIRI ^[1] ; NINOSKA FLORES ^[1] ; ALBERTO GIMÉNEZ TURBA ^[1]
  1. [1] Universidad Mayor de San Andrés

     Universidad Mayor de San Andrés

     Bolivia

     
• Localización: Con-ciencia: Revista de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, ISSN-e 2710-3609, ISSN 2310-0265, Vol. 3, Nº. 1, 2015, págs. 37-45
• Idioma: español
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  • español

    Giardia lamblia es un protozoo intestinal que causa procesos diarreicos de gran impacto epidemiológico en nuestro país, especialmente en niños. Las drogas utilizadas para el tratamiento son eficientes pero muchas producen efectos secundarios, debido a ello existen búsquedas de nuevos agentes antiparasitarios naturales y sintéticos por lo que existe la necesidad de contar con un método de evaluación antiparasitario in vitro sensible, cualitativo y rápido. En el presente estudio se estandarizo in vitro una técnica fluorometrica con el indicador resazurina, el mismo que tiene como base los cambios de oxido-reducción del compuesto resazurina (no fluorescente) a resorufina (fluorescente) debido a la reducción química de las oxidoreductasas presentes en las células viables. Así para la estandarización del método fluorometrico se trabajo con una longitud de excitación y emisión de 540 - 590nm respectivamente, determinando la población parasitaria de trabajo en un rango de 2,5x105 a 1,5 x106 trofozoitos /mL, el tiempo óptimo de incubación se midio a las 2, 3, 4, 5, 6 y 7 horas y la concentración de re-sazurina de 4mM, 2mM, 1mM, 0.5mM y 0.25mM. Una vez obtenidos los datos se determino de manera in vitro la IC50 de varios antiparasitarios convencionales para el tratamiento de Giardia, trabajando con 7,5x105 trofozoitos /mL, tiempo de incubación 4 horas y concentración de aceptor de electrones 2mM, así mismo se trabajo con Alcaloides Totales de Corteza de la Evanta (Galipea longiflora) a una concentración de 100 ug/mL. Obteniendo la IC50 de albendazol (0.4 uM), metronidazol (2.1 uM), tinidazol (1.5uM), mebendazol (0.81 uM) y CAT (77 ug/mL). Logrando estandarizar finalmente un método fluorometrico, sensible y cuantitativo para las evaluaciones anti parasitarias dentro del 1.1.EB.

  • English

    Giardia lamblia is an intestinal proto-zoan that causes epidemiological impact of diarrheal in our country, especially in chil-dren. The drugs used for treatment are effi-cient but many have side effects due to this there are research for new natural and syn-thetic antiparasitic agents so there is impor-tant to uses a sensitive, qualitative and fast method of in vitro antiparasitic evaluation. In this in vitro study it was standardized technique with a fluorometric indicator re-sazurin, the same which is based on redox changes from resazurin (nonfluorescent) to resorufin compound (fluorescent) due to chemical reduction present in oxidoreduc-tases viable cells. So for standardizing the fluorometric method we worked with a length of excita-tion and emission of 540 - 590nm respectively, determining the parasite population working in a range of 1.5 x106 2,5x105 tro-phozoites / mL, optimal incubation time from 2 to 7 hours and resazurin concentra-tion 4mM, 2mM, 1mM, 0.5mM and 0.25mm. Once the data determined was ob-tained, we worked in the IC50 of the con-ventional treatment of Giardia, working with 7,5x105 trophozoites / ml, 4 hours of incubation time and concentration of electron acceptor 2mM, we also determinate the antigiardiasis activity of total alkaloids cortex, CAT, of Evanta (Galipea longiflora). Getting the IC50 of albendazole (0.46 uM), metronidazole (3.12uM), tinidazole (1.22uM), mebendazole (0.43 uM) and CAT (77 ug/mL). Achieving finally standardize a fluoro-metric, sensitive and quantitative method for antiparasitic assessments within the IIFB