Evaluación preliminar de la actividad coagulante del veneno de la serpiente peruana "loro machaco"

• Edith Rodriguez ^[1] ; Gladys Cahuana ^[1] ; Gustavo A. Sandoval ^[1] ; Mirtha Yarleque ^[1] ; Armando Yarleque ^[1]
  1. [1] Universidad Nacional Mayor de San Marcos

     Universidad Nacional Mayor de San Marcos

     Perú

     
• Localización: Revista de la Sociedad Química del Perú, ISSN-e 2309-8740, ISSN 1810-634X, Vol. 76, Nº. 2, 2010, págs. 131-137
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Preliminar evaluation of coagulant activity of Bothrops bilineatus peruvian snake venom "loro machaco"
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    Bothrops bilineatus es una serpiente arboricola causante de numerosos accidentes humanos en la amazonia peruana. A partir del veneno completo se ha realizado una exploracion de la actividad coagulante empleando plasma citratado y fibrinogeno comercial, asi como diversos sustratos cromogenicos. Para ello, se han realizado ensayos de tiempo de coagulacion con plasma humano citratado y fibrinogeno bovino 5 mg/ml en buffer Tris-HCl 0,05 M pH 7,4, midiendose tambien la actividad amidolitica sobre BApNA y esterasica sobre TAME y BAEE. Adicionalmente, el veneno fue fraccionado en una columna de filtracion molecular de Sephadex G-100 con buffer acetato de amonio 0,05 M pH 6,0, analizando la actividad enzimatica en cada una de las fracciones. Ademas, se ha obtenido el perfil electroforetico mediante analisis de PAGE-SDS. Como resultado de este estudio se ha determinado que el veneno total de posee una actividad de 0,59 U/mg sobre plasma y 0,17 U/mg sobre fibrinogeno, siendo estos valores 60% menores en comparacion con el veneno ofidico mas coagulante estudiado en el Peru (Lachesis muta ). Asi tambien, las fracciones con actividad coagulante estan asociadas a la actividad amidolitica y esterasica. El perfil cromatografico obtenido corresponde a tres picos proteicos eluidos con valores de Ve/Vo de 1,1, 1,5 y 2,4, mientras que los electroferogramas obtenidos muestran al menos 10 bandas proteicas entre los 15 y 70 kDa.

  • English

    Bothrops bilineatus is a tree snake whose bite causes many accidents in peruvian jungle. Using whole venom, we made an exploration of its coagulant activity using citrated plasma and commercial fibrinogen, as well as different chromogenic substrates. In this way, we assayed coagulation time on human citrated plasma and bovine fibrinogen 5 mg/ml in Tris-HCl buffer 0,05 M pH 7,4, and also amidolitic and esterasic activities on BApNA, TAME y BAEE, respectively. On the other hand, this venom was fractionated in a size exclusion chromatography using Sephadex G-100 in ammonium acetate buffer 0,05 M pH 6,0, measuring coagulant and amidolitic activities on each fraction. Furthermore, we obtained electrophoretic profiles using SDS-PAGEgels.As a result of this study,we found B. bilineatus venom has activity on plasma (0,59 U/mg) and fibrinogen (0,17 U/mg), being these values 60% lower in compare with the most coagulant venom studied in Peru ( ). Also, fractions obtained with coagulant activity were associated with amidolitic and esterasic activities. Chromatographic profiles showed three main peaks eluted with Ve/Vo of 1,1, 1,5 and 2,4, respectively, while electropherograms obtained, at least 10 protein bands between 15 and 70 kDa.