Aislamiento y caracterización parcial de una enzima similar atrombina del veneno de la serpiente peruana bothrops atrox "jergón"

• Gustavo A. Sandoval ^[1] ; Nora Ruiz ^[1] ; Fanny Lazo ^[1] ; Edith Rodríguez ^[1] ; Armando Yarleque ^[1] ; Russolina B. Zingali ^[2]
  1. [1] Universidad Nacional Mayor de San Marcos

     Universidad Nacional Mayor de San Marcos

     Perú

     
  2. [2] Universidade Federal do Rio de Janeiro

     Universidade Federal do Rio de Janeiro

     Brasil

     
• Localización: Revista de la Sociedad Química del Perú, ISSN-e 2309-8740, ISSN 1810-634X, Vol. 76, Nº. 2, 2010, págs. 156-164
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • isolation and partial characterization of a thrombin-like enzyme from bothrops atrox peruvian snake venom "jergón"
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• Resumen
  • español

    Se ha determinado algunas propiedades bioquímicas de la enzima similar a trombina (EST) de la serpiente peruana "jergón". Para este fin, la enzima fue purificada utilizando tres pasos cromatrográficos: Sephadex G-75, CM-Sephadex C-50 y Agarosa-PAB. Asimismo, se determino el peso molecular por PAGE-SDS y el porcentaje de carbohidratos asociados mediante hidrolisis y análisis de hexosas, hexosaminas y acido siálico. Se ensayaron las actividades fibrinocoagulante, amidolìtica y esterásica, sobre fibrinógeno bovino, BApNA y BAEE, respectivamente. Como resultado del análisis se determino que la enzima constituye el 1,7% del veneno completo, siendo purificada 25,5 veces y con un rendimiento del 43,3% utilizando BApNA como sustrato. La enzima presenta un peso molecular de 29,6 kDa, del cual el 14,2% lo constituyen los carbohidratos asociados. La EST de B. atrox produjo coagulación del fibrinógeno bovino y presento actividad sobre BAEE y BApNA. De esta manera se ha logrado purificar y caracterizar al principal componente del veneno de B. atrox relacionado con su actividad coagulante.

  • English

    We have determined some biochemical properties of a thrombin-like enzyme (TLE) isolated from Bothrops atroxperuvian snake venom "jergon". In this concern, TLE was purified until homogeneity using three chromatographical steps: on Sephadex G-75, CM-Sephadex C-50 and Agarose-PAB. Furthermore, molecular weight was determinate by PAGE-SDS and associated carbohydrates by hydrolysis and analysis of hexoses, hexosamines and sialic acid. Then, fibrinocoagulant, amidolytic and sterasic activities were measured on bovine fibrinogen, BApNAand BAEE, respectively.As a result of these analyses, we determined that this enzyme represents 1,7% of total venom and was 25,5-fold purified with a 43,3% yield,using BApNA as substrate. This enzyme had 29,6 kDa, where 14,2% was associated carbohydrates. The TLE of B. atrox produced coagulation of bovine fibrinogen and had enzymatic activity on BAEE and BApNA. In conclusion, we have purified and characterized the main component of B. atrox venom related to its coagulant activity.