Resumen de Expresión diferencial de proteínas en Leishmania (Viannia) panamensis asociadas con mecanismos de resistencia a antimoniato de meglumina

Ronald Guillermo Peláez Sánchez, Carlos Enrique Muskus, Patricia Cuervo, Marcel Marín Villa

• español

  Introducción. Los mecanismos de resistencia al antimonio pentavalente conocidos hasta el momento,se han descrito ampliamente en cepas del subgénero Leishmania, pero poco se sabe sobre lasproteínas involucradas en los mecanismos de resistencia presentes en cepas del subgénero Viannia,como Leishmania panamensis.Objetivo. Identificar proteínas diferencialmente expresadas entre las cepas de L. panamensis(UA140), sensible y resistente al antimonio pentavalente, y analizar el posible papel de estas proteínasen mecanismos de resistencia.Materiales y métodos. Las proteínas de las cepas, sensible y resistente al antimonio pentavalente, secompararon usando electroforesis bidimensional. Las proteínas con aumento de la expresión fueronaisladas e identificadas por espectrometría de masas mediante MALDI-TOF/TOF (Matrix AssistedLaser Desorption Ionization/Time of Flight). La expresión del ARNm de cinco de estas proteínas secuantificó mediante PCR en tiempo real.Resultados. Los geles bidimensionales de las cepas sensible y resistente detectaron 532±39 y 541±43manchas proteicas. Se encontraron 10 manchas con aumento de la expresión en la cepa resistente,identificadas como proteínas de choque térmico (Hsp60 mitocondrial, Hsp70 mitocondrial y citosólica),isomerasa de disulfuro, proteasa de cisteína, enolasa, factor de elongación 5-α, la subunidad 5-α delproteasoma y dos proteínas hipotéticas nombradas como Sp(2) y Sp(25).Conclusión. Este es el primer estudio llevado a cabo con una cepa resistente al antimonio pentavalenteen L. panamensis, en el cual se han identificado proteínas que están relacionadas con el mecanismode resistencia del parásito frente al medicamento, abriendo el camino para futuros estudios de estasproteínas como blancos terapéuticos. doi: http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v32i3.392 

• English

  Introduction. The well-known drug resistance mechanisms to pentavalent antimony have beenwidely described in strains of the Leishmania subgenus, but little is known about the mechanisms ofresistance and the proteins associated with it in strains of the Viannia subgenus such as Leishmaniapanamensis.Objective. Differentially expressed proteins were identified between pentavalent antimonial sensitiveand resistant L. panamensis (UA140) strains, and the role of these proteins was analyzed as possibleresistance mechanisms.Materials and methods. The protein lysates of pentavalent antimony sensitive and resistant strainswere separated by two-dimensional gel electrophoresis, and the protein patterns compared. Theproteins identified as overexpressed were separated and analyzed using MALDI-TOF/TOF (MatrixAssisted Laser Desorption Ionization/Time of Flight). The level of mRNA expression of five of theseproteins was quantified using real-time PCR.Results. On the 2-dimensional gels, 532 ± 39 protein spots were identified for the sensitive strains,and 541 ± 43 spots for the resistant strains. Ten spots were overexpressed in the resistant strain andidentified as heat shock protein (Hsp60 mitochondrial, Hsp70 cytosolic and mitochondrial), disulfideisomerase, cysteine protease, enolase, elongation factor 5-alpha, the proteasome alpha-5 subunit andtwo hypothetical proteins named as Sp(2) and Sp(25).Conclusion. This is the first proteomic study conducted with a L. panamensis resistant strain whereseveral proteins were identified and related with the parasite resistance mechanism to pentavalentantimony. This opens the way for future studies aimed at modulating the drug resistance or at evaluatingthese proteins as therapeutic targets.doi: http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v32i3.392