Identificação de Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira intermedia em aves de postura e matrizes comerciais pela técnica de hibridização fluorescente in situ (FISH) em tecidos incluídos em parafina

• Leonardo Gruchouskei ^[1] ; Ronaldo José Piccoli ^[2] ; Jessica Santos Streauslin ^[3] ; João Pedro Cavasin ^[4] ; Mônica Regina de Matos ^[5] ; Mayane Faccin ^[6] ; Aline de Marco Viott ^[7]
  1. [1] Universidade Federal da Fronteira Sul. Brasil
  2. [2] Universidade Federal de Santa Catarina. Brasil
  3. [3] Department of Veterinary Microbiology and preventive Medicine. Iowa State University. USA
  4. [4] Department of Small animal Clinical Sciences. Texas a&M University. USA
  5. [5] 5Universidade Estadual do oeste do Paraná. Brasil
  6. [6] Department of Veterinary Pathobiology. Texas a&M University. USA
  7. [7] Universidade Federal do Paraná. Brasil

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• Localización: Ciencia rural, ISSN 0103-8478, Vol. 54, Nº. 10, 2024
• Idioma: portugués
• Títulos paralelos:
  • Identification of Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae and Brachyspira intermedia in commercial laying hens and commercial broiler breeders using fluorescence in situ hybridization (FISH) in paraffin-embedded tissues
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• Resumen
  • English

    Bacteria of the genus Brachyspira can cause enteric diseases in birds; thus, this study evaluated the efficacy of the fluorescence in situ hybridization (FISH) technique for the identification of B. pilosicoli, B. hyodysenteriae and B. intermedia using cecum samples fixed in formaldehyde from laying hens and commercial broiler breeders. Samples were collected from 112 birds aged between 35 and 82 weeks that originated from commercial laying and broilers farms. For the initial evaluation, spirochaetes were isolated from the cloacal swabs. positive samples were analysed using qpCR to identify pathogenic species. Formalized cecum segments of these same birds were then analyzed using the FISH technique with labelled probes specific to B. pilosicoli, B. hyodysenteriae and B. intermedia. Forty isolates characteristic of Brachyspira were obtained, of which 14 were identified as B. hyodysenteriae and seven were identified as B. intermedia by qpCR; two samples were positive for both species, and 21 were not characterized. Using the FISH technique, 52 samples were positive for Brachyspira spp., 22 were positive for B. hyodysenteriae, 28 were positive for B. intermedia, seven were positive for B. pilosicoli, and eight were positive for two species. The FISH technique was able to identify significantly more positive birds compared with bacterial isolation followed by qPCR. Thus, it is concluded that the FISH technique was effective for identifying the three Brachyspira species evaluated and can thus be used as a rapid and effective diagnostic tool

  • português

    Bactérias do gênero Brachyspira podem ocasionar enfermidades entéricas em aves, assim o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da técnica de hibridização fluorescente in situ (FISH) para a identificação de Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira intermedia utilizando amostras de ceco de aves de postura e matrizes comerciais fixados em formol. Foram coletadas amostras de 112 aves entre granjas de postura comercial e granjas de matrizes de corte com idade entre 35 e 82 semanas. Para avaliação, primeiramente procedeu-se ao isolamento bacteriano a partir das fezes. As amostras positivas foram submetidas a qPCR para identificação de espécies patogênicas. posteriormente, segmentos formolizados de ceco dessas mesmas aves, foram processados pela técnica de FISH utilizando sondas marcadas de Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira intermedia. Das 112 amostras foram obtidos 40 isolamentos característicos de Brachyspira e destes, na qPCR, 14 identificadas como B. hyodysenteriae e sete como B. intermedia, duas amostras foram positivas para ambas e 21 não foram caracterizadas. Na técnica de FISH, 52 amostras foram positivas para Brachyspira sp., 22 para B. hyodysenteriae, 28 para B. intermedia, sete para B. pilosicoli e oito amostras foram positivas para duas espécies. A avaliação estatística revelou que a técnica de FISH foi capaz de indicar maior número de aves positivas quando comparada ao isolamento bacteriano seguido por qpCR, inclusive revelando aves positivas para B. pilosicoli que não tinham sido identificados anteriormente. Dessa forma, conclui-se que a técnica de FISH apresentou-se eficiente para identificação das Brachyspiras avaliadas, servindo assim como uma ferramenta rápida e eficiente para o diagnóstico