Claudia Valencia, Doris Zúñiga
Para el proceso de optimización de protocolos se probaron diferentes modificaciones del proceso de tinción propuesto por Phillips & Hayman para permitir la identificación de estructuras intra-radicales derivadas de la interacción planta-hongo; para ello, se extrajeron las raíces de cultivos de algodón (Gossypium barbadense L.) inoculados con Bacillus megaterium (B), Bradyrhizobium yuanmingense (Br) y la interacción de ambos (I), además los controles positivo, con nitrato de potasio, (N+) y negativo, sin inoculación, (N-). Una vez optimizado el protocolo se realizó un conteo de segmentos para calcular el porcentaje de infección natural por Micorrizas Arbusculares (MA) en relación a los tratamientos de fertilización usados. Se encontró que seis de las nueve modificaciones realizadas permiten identificar la presencia de micorrizas en las raíces de algodón, pero la variación D logra una mejor visualización de las características morfológicas de las MA. Se observó también que el %LRC es bajo (28.77%) en N+, mientras que la colonización micorrícica se promueve cuando las plantas son inoculadas con B, alcanzando en promedio un 70.98%. La optimización de los protocolos permite aminorar los costos en la investigación y la contaminación por el uso de reactivos cancerígenos; del mismo modo, encontrar una relación entre las rizobacterias promotoras del crecimiento de las plantas (PGPR) y las MA nos ayuda a identificar nuevas formas de inoculación, lo que permite aumentar la producción.
For the process of protocol optimization, different staining process modifications proposed by Phillips & Hayman, which allow identification of intra-radicals structures derived from the plant-fungus interactions, were tested. For the said purpose, the roots of cotton plants (Gossypium barbadense L.) were extracted. These plants were previously inoculated with Bacillus megaterium (B), Bradyrhizobium yuanmingense (Br) separately and as well as in combination (I). In addition to this, a positive control with potassium nitrate (N+) and without it (N-) were also included. After the optimization of the staining procedure a count of the segments procedure was carried out to estimate the prevalence of infection by Arbuscular mycorrhizal (AM) in relation to the kind of fertilizers utilized. We found that six of the nine staining modifications allow the identification of the presence of mycorrhiza in roots of cotton plants, however, the variation D provides a better visualization of the morphological characteristics of AM. It was also noticed that the % LRC was low i.e. 28.77% in N+, while the mycorrhizal colonization was most favored when plants were inoculated with B, reaching an average of 70.98% LRC. Optimizations of standard protocols help reduce the cost and the exposure by the carcinogenic reagents. In conclusion, finding a relationship between AM and plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) will help us to identify new ways of inoculation to increase production.
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