Resumen de Construcción en Escherichia coli del Plásmido pAmeA2 que Contiene el Gen csrA de Bacillus licheniformis M2-7

Augusto Rojas Aparicio, America Yaret Bello Mendoza, José Alberto Hernández Eligio, Alejandro Bolaños Dircio, Yanet Romero Ramírez

• español

  Actualmente el uso de los hidrocarburos aromáticos policíclicos se ha asociado a la contaminación de la flora y fauna, repercutiendo sobre la salud humana. Para corregir esta problemática, se han desarrollado métodos de biorremediación basados en la aplicación de microorganismos capaces de restaurar ambientes contaminados con este tipo de hidrocarburos. Uno de los modelos bacterianos utilizados es la cepa de Bacillus licheniformis M2-7, que tiene la capacidad de degradar HAPs. Esto lo lleva a cabo a partir del sistema Csr, que contiene el gen csrA que codifica para la proteína CsrA, asociada a la motilidad y capacidad de utilizar hidrocarburos como fuente de carbono. La presente investigación tuvo como objetivo la construcción del plásmido que contiene el gen csrA de B. licheniformis M2-7. Para ello se caracterizó in silico el gen csrA, se realizó la extracción del ADN de B. licheniformis M2-7 y la amplificación del gen csrA por PCR. El gen fue clonado en el vector pJET1.2/Blunt para la construcción del plásmido. Se transformaron y seleccionaron a las cepas de E. coli, para posteriormente confirmar la presencia de csrA por PCR, digestión enzimática y secuenciación. Se logró construir y confirmar la presencia del plásmido pAmeA2.

• English

  Currently, the use of polycyclic aromatic hydrocarbons has been associated with the contamination of flora and fauna, affecting human health. To correct this problem, bioremediation methods have been developed based on the application of microorganisms capable of restoring environments contaminated with this type of hydrocarbons. One of the bacterial models used is the Bacillus licheniformis M2-7 strain, which has the capacity to degrade PAHs. This is carried out by the Csr system, which contains the csrA gene that codes for the CsrA protein, associated with motility and the capacity to use hydrocarbons as a carbon source. The present investigation was aimed at constructing the plasmid containing the csrA gene of B. licheniformis M2-7. For this purpose, the csrA gene was characterized in silico, the DNA of B. licheniformis M2-7 was extracted and the csrA gene was amplified by PCR. The gene was cloned into the pJET1.2/Blunt vector for plasmid construction. E. coli strains were transformed and selected, and the presence of csrA was confirmed by PCR, enzymatic digestion and sequencing. The presence of the plasmid pAmeA2 was constructed and confirmed.