Resumen de Aplicación de la tecnología lamp (Loop-mediated isothermal amplification) para el diagnóstico molecular de infecciones por Schistosoma haematobium

Daniel Mateos Carril, Beatriz Crego Vicente, Manuel Diego Del Olmo, Pedro Fernández Soto

• español

  Schistosoma haematobium (agente causal de la esquistosomosis genitorurinaria) afecta a 112 millones de personas en 54 países de África y Oriente. El diagnóstico de referencia es la observación microscópica de huevos del parásito en orina de pacientes, aunque con limitaciones. El diagnóstico serológico y molecular también presentan limitaciones y son difíciles de realizar en áreas endémicas. Una alternativa es la amplificación isotérmica de ácidos nucleicos tipo LAMP. En estudios previos desarrollamos un método molecular basado en la tecnología LAMP para detectar ADN de S. haematobium (Sh-LAMP) con alta especificidad y sensibilidad. Aquí, evaluamos su funcionamiento en muestras de orina recolectadas en una zona endémica de esquistosomosis urogenital (Cubal, Angola). Seleccionamos 33 muestras de orina con análisis microscópico de campo: 14 negativas y 19 positivas. Se extrajo el ADN y se analizaron mediante Sh-LAMP colorimétrico. Obtuvimos un resultado Sh-LAMP positivo (89,5%) en 17/19 muestras microscópicamente positivas y negativo en las 14 muestras microscópicamente negativas. La facilidad de uso e interpretación y el nivel de reproducibilidad de los resultados respecto a la microscopía, sugieren que el Sh-LAMP puede ser una herramienta eficaz para el diagnóstico molecular de la esquistosomosis urogenital y útil en estudios epidemiológicos de mapeo y control de la enfermedad.

• English

  Schistosoma haematobium (the causative agent of genitorurinary schistosomiasis) affects 112 million people in 54 countries in Africa and the East. The gold standard diagnosis is microscopic observation of parasite eggs in urine of patients, although with limitations. Serological and molecular diagnosis also have limitations and are difficult to perform in endemic areas. An alternative is isothermal LAMP-type nucleic acid amplification. In previous studies we developed a molecular method based on LAMP technology to detect S. haematobium DNA (Sh-LAMP) with high specificity and sensitivity. Here, we evaluated its performance on urine samples collected in a urogenital schistosomiasis endemic area (Cubal, Angola). We selected 33 urine samples with field microscopic analysis: 14 negative and 19 positive. DNA was extracted and analysed by colorimetric Sh-LAMP. We obtained a positive Sh-LAMP result (89.5%) in 17/19 microscopically positive samples and negative in the 14 microscopically negative samples. The ease of use and interpretation and the level of reproducibility of the results with respect to microscopy suggest that Sh-LAMP can be an effective tool for molecular diagnosis of urogenital schistosomiasis and useful in epidemiological mapping and disease control studies.