Caracterización estructural y funcional de los promotores humanos SREBP1 y su regulador INSIG2

• Autores: Ana Julia Fernández-Álvarez
• Directores de la Tesis: Marta Casado Pinna (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de València ( España ) en 2009
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Ramón Bartrons Bach (presid.), Ramón Sendra Pérez (secret.), Domingo Barettino Fraile (voc.), Verónica Noé Mata (voc.), María José Martínez Díaz Guerra (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Procesos metabólicos
      • Biología molecular
  • Ciencias de la vida
    • Biología celular
      • Cultivo celular
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en:  Digital CSIC  TDX  TDX 
• Resumen

  • Las proteínas SREBP son factores de transcripción que regulan la homeostasis lipídica. Estas proteínas son activadas por procesamiento proteolitico regulado por las proteínas SCAP e INSIG. Alteraciones en estas proteínas se han relacionado con el desarrollo del síndrome metabólico. El objetivo de la tesis fue la caracterización a nivel estructural y funcional de la regulación transcripcional de esta via, estudiando especificamente los promotores de los genes humanos que codifican las porteínas SREBP1a, SREBP1c e INSIG2. Se utilizaron técnicas de analisis tanscripcional por ensayos de luciferasa con construcciones silvestres y mutantes, ensayos de movilidad electroforética (EMSA), RT-PCR, PCR a tiempo real, RNA de interferencia y experimentos de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP). De los resultados obtenidos se puede demostrar que: -El promotor SREBP1a humano está comprendido en 75 pb que contienen 3 cajas GC que se unen a las proteínas SP1 y EGR1, con acciones opuestas sobre el promotor, siendo SP1 un activador y EGR1 un inhibidor de la actividad. - El promotor SREBP1c humano es activado por insulina y agonistas LXR e inhibido en presencia de cAMP y PUFAs al igual que el promotor de ratón. Además es ativado por los PPARs . El cofactor PGC1 es reclutado al promotor en los tratamientos con insulina y con un agonista PPARalpha (WY). - En humanos a diferencia del ratón existe una úncia variante de mRNA de INSIG2. El pormotor INSIG2 humano es activado por la proteínas SAP1a en células de origen hepático y por ELK1 y SAP1a en células de origen renal. La proteínas SAP1a debe estar fosforilada para activar al promotor y esta acción es independiente de SRF.