Estudio de las células madre del bulbo olfatorio y su regulación por el nicho astroglial

• Autores: Mireia Moreno Estellés
• Directores de la Tesis: Helena Mira Aparicio (dir. tes.), Pilar Gómez Ramos (tut. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2012
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Carlos Vicario Abejón (presid.), Pilar Sánchez Gómez (secret.), Antonella Consiglio (voc.), Eva Cano López (voc.), Victoria Aixa Morales García (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología celular
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: digitool-uam.greendata.es
• Resumen

  • Las células madre neurales del cerebro adulto (NSCs) no están confinadas a la zona subventricular ( SVZ) y el giro dentado del hipocampo, que son los nichos más importantes de células madre. Investigaciones recientes proponen al bulbo olfatorio ( OB) como una fuente de NSCs que aún permanece inexplorada. En este trabajo, ampliamos la evidencia de la existencia de NSCs en el OB, e investigamos su regulación.

    Primero empleamos un procedimiento de marcaje simple, basado en la incorporación del análogo halogenado de la timidina BrdU, para marcar células proliferantes de la SVZ y del OB. Combinando la detección de BrdU con inmunofluorescencias para marcadores de células madre neurales, identificamos la existencia de una población de células en división en el centro del bulbo olfatorio. El doble marcaje con dos análogos halogenados de la timidina, CldU e IdU, muestra que la población candidata de células madre neurales del OB son células de lenta división que pueden dividirse varias veces. El análisis comparativo in vivo revela que las células madre neurales del OB son más quiescentes que las de la SVZ; sin embargo, el marcaje con vectores lentivirales sugiere que ambas tienen propiedades neurogénicas. El aislamiento in vitro de neuroesferas, basado en la separación para el epítopo GLAST, indica un linaje común GLAST + de las células con capacidad esferogénica tanto en los cultivos primarios del OB y como de la SVZ. A pesar de las diferencias encontradas inicialmente en las neuroesferas primarias de OB y SVZ, después de cierto número de pases, ambos cultivos se comportan de forma similar.

    Se sabe que las células astrogliales son un componente activo en los nichos de células madre del adulto. Sin embargo, se conoce poco acerca del papel regulador que el nicho astroglial ejerce sobre las OB-NSCs. Analizamos la auto-renovación y proliferación de las OB-NSCs en co-cultivo con astrocitos procedentes del OB y de la SVZ. De acuerdo con las diferencias observadas in vivoen la actividad de las OB-NSCs y de las SVZ-NSCs, encontramos que la astroglía del nicho de la SVZ promueve la actividad de las NSCs, mientras que la glía del OB produce el efecto contrario. Wnt7a, un ligando de la vía de las WNTs, se sobreexpresa en astrocitos de la SVZ y, Sfrp4, un antagonista de la vía de las WNTs, se sobreexpresa en astrocitos del OB. Esta expresión diferencial entre glías apunta a la señalización por WNTs como una vía que podría explicar las diferencias observadas en los co-cultivos in vitro. Los ensayos funcionales demuestran que la vía de señalización no canónica de WNT7A aumenta las divisiones simétricas de las NSCs, mejorando así la expansión de las células madre en cultivo. De esta forma, proponemos a WNT7A como una señal glial específica de nicho, que podría estar detrás de las diferencias encontradas in vivo a nivel de quiescencia entre las OB-NSCs y las SVZ-NSCs. Además, sugerimos su uso como herramienta para manipular las NSCs in vitro, antes de ser trasplantadas con fines terapéuticos.