Reconstitución artificial de proteínas asociadas a citoesqueleto en sistemas modelo de mebrana: un estudio biofísico de su función mecánica

• Autores: Silvia Isanta Amela
• Directores de la Tesis: Francisco Monroy Muñoz (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2015
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Jesús Pérez Gil (presid.), Iván López Montero (secret.), Marisela Vélez Tirado (voc.), José M. Valpuesta (voc.), Mariano Sixto Carrion Vazquez (voc.)
• Programa de doctorado: Programa Oficial de Doctorado en Bioquímica, Biología Molecular y Biomedicina
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Bioquímica física
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense (pdf)
• Resumen

  • En la presente tesis doctoral se ha realizado el estudio de la función mecánica de tres proteínas que son básicas para el desarrollo de la vida a nivel celular. Las tres proteínas de estudio son la cadherina, la actina y la espectrina. Todas ellas están relacionadas con el esque-leto celular eucariota, las dos primeras formando parte esencial del córtex celular asociado a la membrana y la espectrina siendo la proteína básica del esqueleto de membrana del glóbulo rojo. Las cadherinas son moléculas hemofílicas que se caracterizan por interaccionar sola-mente con moléculas de la misma familia y son las responsables de la formación de contactos célula-célula estables en presencia de iones calcio. La familia de las cadherinas es particular-mente importante en los procesos dinámicos de regulación de los contactos adhesivos que están a su vez relacionados con diversos procesos morfogenéticos y de desarrollo. Las cadheri-nas están formadas por tres fragmentos claros, un dominio extracelular formado por cinco ectodominios globulares (ectodominio), un dominio helicoidal transmembrana y un dominio intracelular, el cuál interacciona con el citoesqueleto a través de un complejo proteico de ca-teninas. En esta tesis doctoral se realiza el estudio adhesivo a través del ectodominio completo obtenido a partir de la transformación genética de la cadherina eucariota. El objetivo de traba-jo con esta proteína es estudiar la energética del proceso adhesivo entre dos vesículas a partir de los ángulos de contacto y módulo de rigidez, así como estudiar la dinámica del contacto adhesivo entre dos vesículas y su reversibilidad mediante fuerzas de tracción mecánica y ten-sión lateral de membrana ejercida con la técnica de manipulación de micropipetas, y la micro-estructura del contacto adhesivo gracias a la crio-microscopía de transmisión electrónica...