Resumen de Estudio de anticuerpos específicos en enfermos tuberculosos
Un test diagnóstico para la tuberculosis rápido y económico sería de gran utilidad en los países con escasos recursos y tasas elevadas de enfermedad tuberculosa. La necesidad de una prueba de estas características es aún más acuciante en aquellos países donde la expansión de la tuberculosis está favorecida por la coinfección con el VIH. Por ello, los objetivos de esta tesis han sido los siguientes:
1.Evaluar los niveles de anticuerpos en enfermos tuberculosos, en individuos sanos y en pacientes con otras patologías respiratorias frente a 3 nuevos compuestos glicolipídicos, DATF (2,3-diacyl-trehalosa obtenido de M.fortuitum), BDA.TDA (Ácido dicarboxílico trehalosa bis(N,N-dioctadecylamida) antígeno sintético) y LOS (lipooligosacárido obtenido de M. tuberculosis) por separado y en asociación. Se han incluido los sueros de pacientes con otras patologías respiratorias debido a que cuando se quiere estudiar una prueba diagnóstica en el grupo control deben de haber pacientes que planteen problemas de diagnóstico diferencial con la enfermedad que se está estudiando.
2. Estudiar la cinética de los anticuerpos específicos frente a 5 antígenos: PGL-Tb1 (fenolglicolípido obtenido de M. tuberculosis), DATT (2-3-diacyl-trehalosa obtenido de M. tuberculosis), DATF, BDA.TDA y LOS antes del momento del diagnóstico de la tuberculosis en pacientes infectados con el VIH.
3. Los estudios de la presencia de anticuerpos específicos IgG e IgM antes del diagnóstico de la tuberculosis se han realizado en pacientes infectados con el VIH que desarrollaron tuberculosis. Pero ¿qué ocurre en aquellos pacientes infectados con el VIH que no han desarrollado tuberculosis?. En ambos grupos de pacientes se estudiará la relación entre anticuerpos, recuento de linfocitos T CD4+ e hipersensiblidad cutánea a PPDS.
Las conclusiones más relevantes han sido:
1. Evaluación de los nuevos antígenos glicolipídicos DATF, BDA.TDA y LOS aisladamente.
1.No todos los antígenos se comportan de la misma forma. Con los 3 antígenos, en los pacientes tuberculosos predominaron las inmunoglobulinas específicas de tipo IgG y en los grupos control predominaron las inmunoglobulinas específicas de tipo IgM excepto con el antígeno LOS.
2.Hubo diferencias significativas entre los pacientes tuberculosos vs. controles con los 3 antígenos estudiados para IgG pero no para IgM.
3.El antígeno DATF es con el que se han obtenido los mejores resultados para la inmunoglobulina específica de tipo IgG ya que fue el antígeno que mejor clasificó a los enfermos tuberculosos respecto a los grupos control (p<0.05) pero con una sensiblidad moderada (55,4%).
4.Hay una correlación negativa significativa entre el tamaño del PPD y el título de anticuerpos de tipo IgG frente al antígeno DATF en los pacientes tuberculosos (p=0,038). Con el resto de antígenos la correlación no fue significativa.
2. Combinación de antígenos DATF, BDA.TDA y LOS .
5.Si valoramos, en los pacientes tuberculosos respecto a los controles sanos, un resultado positivo de la inmunoglobulina específica IgG a cualquier antígeno, en la combinación de 2 o 3 antígenos la sensibilidad aumenta del 60 al 70% con una especificidad entre el 98,8 y el 100% .
6.Con los resultados obtenidos de sensibilidad y especificidad con los diferentes antígenos glicolipídicos estudiados la serología no sería útil para el diagnóstico de la enfermedad tuberculosa si no es en combinación.
3. Cinética de las inmunoglobulinas con 5 antígenos glicolipídicos PGL-Tb1, DATT, DATF, BDA.TDA y LOS.
7.Se detectaron anticuerpos frente a los cinco antígenos glicolipídicos estudiados hasta 48 meses antes del diagnóstico de la tuberculosis y para ambas inmunoglobulinas, IgG e IgM.
8.A los 12-7 meses antes de la aparición de los síntomas clínicos se produce un descenso significativo de la inmunoglobulina específica IgG frente a todos los antígenos estudiados excepto DATF y LOS y en el mismo periodo de tiempo sólo presentó un descenso significativo de la inmunoglubulina específica IgM el antígeno PGL-Tb1.
4. Relación entre inmunoglobulinas específicas frente al antígeno DATT y los linfocitos T CD4+.
9.Cuando la inmunidad celular desciende la humoral aumenta en los pacientes tuberculosos. Los pacientes tuberculosos VIH+ tuvieron una media de CD4+ significativamente menor que los pacientes no tuberculosos VIH+, y tuvieron también unas medias de IgG e IgM significativamente más elevadas que los pacientes no tuberculosos VIH+.
10.Con una cantidad de linfocitos T CD4+ inferior a 300 CD4/mm3 la respuesta que se produce frente a M. tuberculosis es de tipo Th2, es decir, una respuesta humoral de tipo IgG e IgM.
11.A partir de 300 CD4/mm3 además de la respuesta de tipo Th2 aparece una respuesta de tipo Th1 y más concretamente aparece la hipersensibilidad retarda ya que es a partir de esta cifra de linfocitos en que aparece el PPD positivo, así entre 300 y 500 CD4/mm3 se produciría una respuesta tipo Th2 y Th1 (Hipersensibilidad retardada) y por ello observamos anticuerpos IgG e IgM. En esta fase el PPD puede ser positivo o negativo.
12.Independientemente de la presencia o no de enfermedad tuberculosa todos los pacientes VIH+ con un número de linfocitos T CD4+ comprendido entre 100 y 500 CD4/mm3 presentaron una correlación positiva significativa entre CD4+ y las inmunoglobulinas IgG e IgM. Esta correlación se invierte a partir de 500 CD4/mm3 .
13.En una persona inmunodeprimida o con recuento de linfocitos <500 CD4/mm3 la presencia de inmunoglobulinas específicas de tipo IgG ó IgM indicaría infección tuberculosa. Si se le realizan controles a estos pacientes inmunodeprimidos, la disminución de los niveles de las inmunoglobulinas específicas de tipo IgG ó IgM indicaría que podrían desarrollar la enfermedad tuberculosa.
14.A partir de 500 CD4/mm3 disminuye la respuesta Th2 posiblemente por un aumento de la respuesta tipo Th1 no sólo por la hipersensibilidad retardada sino porque se añadiría la inmunidad celular protectiva que también es una respuesta Th1.
15.En una persona inmunocompetente o con un recuento de linfocitos superior o igual a 500 CD4/mm3, la presencia de inmunoglobulinas específicas de tipo IgG indicaría enfermedad tuberculosa y la presencia de inmunoglobulinas específicas de tipo IgM indicaría infección tuberculosa.
16.Se demuestra que hay un equilibrio entre la inmunidad celular y la inmunidad humoral que vendría dado por el recuento de linfocitos T CD4+ y que coincidiría con el espectro inmunológico de la lepra realizado por Riedley y Jopling. Así, los dos extremos inmunes estables corresponderían con un recuento de linfocitos T CD4+ inferior a 300 CD4/mm3 y un recuento de linfocitos T CD4+ superior a 500 CD4/mm3 en los que habría un predominio de la inmunidad humoral y celular respectivamente.
