Papel de la ruta VHL/HIF en el desarrollo de páncreas
- Autores: Alejandro Garcia Nuñez
- Directores de la Tesis: David Antonio Cano González (dir. tes.), Alonso Leal Cerro (tut. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Sevilla ( España ) en 2014
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: José Villar Ortiz (presid.), Iván Quesada Moll (secret.), Rosa María Gasa Arnaldich (voc.), José Ignacio Piruat Palomo (voc.), Amancio Carnero (voc.)
- Materias:
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- Resumen
Las células responden a la hipoxia (bajos niveles de oxígeno) activando un programa génico específico para adaptarse a metabolismo anaérobico, para potenciar el suministro de sangre y promover la conservación de la energía. La respuesta a hipoxia está mediada por el factor de transcripción HIF (del inglés Hypoxia Inducible Factor) cuya actividad está regulada por un complejo proteico del que forma parte el gen supresor de tumores VHL (Von Hippel Lindau), que degrada a HIF en presencia de oxígeno. Recientemente varios estudios han puesto de manifiesto la importancia de la ruta hipoxia/HIF puede tener sobre diversos aspectos de la célula beta y su relevancia en el contexto de la diabetes. Los niveles de esta ruta están alterados en islotes de pancientes diabéticos. Por otra parte, estudios en animales han mostrado que tanto la pérdida como la excesiva activación de HIF interfiere en la capacidad de secreción de insulina en respuesta a la glucosa de las células beta. En este estudio nos planteamos determinar si la ruta de hipoxia/HIF afecta a la función de otras células endocrinas pancreáticas. Por otra parte, queremos explorar el efecto de la manipulación de la ruta de hipoxia/HIF sobre la formación embrionaria del páncreas endocrino.
Nuestros experimentos se han realizado en ratones en los que mediante la tecnología Cre-¿Loxp conseguimos activar las proteínas HIF específicamente en el páncreas. Mediante técnicas de inmunohistoquímica y Biología Molecular hemos analizado el efecto de la activación de las proteínas HIF en la formación de estos tejidos. La secreción de insulina y glucagón se realizó tanto in vivo en animales como in vitro en cultivo de islotes y los niveles se midieron mediante ELISA.
La inactivación de VHL (y la consiguiente activación de las proteínas HIF) en páncreas produce la muerte de estos individuos a edades tempranas (entre dos y tres semanas después del nacimiento). Nuestros resultados muestran que esta letalidad es consecuencia de una hipoglucemia continua tras el nacimiento, la cual parece deberse a un fallo en la secreción tanto de insulina como glucagón en respuesta a los niveles cambiantes de glucosa.
Mediante el uso de modelos de activación de HIF, independiente de otros miembros de la ruta hemos observado defectos en el desarrollo del islote así como en su función.
Nuestros resultados extienden estudios previos sobre la importancia de la ruta de hipoxia/HIF en la función de células pancreáticas endocrinas. En particular, nuestros resultados sugieren un papel de esta ruta sobre el control de la secreción de glucagón.
