Interacción de la fructosa-1-,6-bisfosfatasa cloroplastídica con su modulador tiorredoxina: modelización molecular y caracterización experimental

• Autores: Owen S. Wangensteen
• Directores de la Tesis: Ana Chueca Sancho (dir. tes.), Julio López Gorgé (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Granada ( España ) en 2000
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Juan López Barea (presid.), José Antonio Lupiáñez Cara (secret.), Luis Alfonso del Río Legazpi (voc.), Pedro Luis Mateo Alarcón (voc.), Francisco Miguel Cánovas Ramos (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
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• Resumen

  • La fructosa-1,6-bisfosfatasa (FbPasa) cloroplastídica es una enzima del ciclo de Benson-Calvin que es activada por la luz a través del sistema ferredoxina-tiorredoxina.

    El lugar de unión de la FBPasa es una zona muy expuesta al medio y cargada negativamente denominada "bucle-170". Se ha profundizado en el estudio molecular de la interacción entre esta enzima y su activador, la tiorredoxina (Trx). Se ha propuesto un modelo teórico tridimensional para esta interacción, en el cuál el lugar de unión de la Trx es un surco hidrófobo localizado en la cara del centro activo y rodeado de aminoácidos cargados positivamente, en el cuál encajaría el bucle de la proteína diana, en un proceso en el cuál estarían implicadas interacciones tanto de carácter electrostático como hidrofóbico. El modelo se ha comprobado experimentalmente mediante medidas de la capacidad de activación sobre FBPasa de diversos mutantes de Trx, así como determinando los parámetros del equilibrio de unión mediante la técnica de diálisis en equilibrio y los potenciales de oxidación-reducción de los distintos mutantes de Trx mediante titulaciones con monobromobimano. Así mismo, se han realizado medidas de la capacidad de activación de los diversos mutantes de Trx sobre la NADP-malato-deshidrogenasa, otra enzima del cloroplasto activable por la Trx. Los resultados avalan nuestra hipótesis del surco hidrófobo para la interacción de las Trxs con sus proteínas diana.#