Análisis de los dominios funcionales del receptor de progesterona en líneas celulares estables de cáncer de mama

• Autores: Ignacio Quiles
• Directores de la Tesis: Miguel Beato del Rosal (dir. tes.), Albert Jordan Valles (codir. tes.)
• Lectura: En la Universitat Pompeu Fabra ( España ) en 2007
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Miguel Ángel Valverde De Castro (secret.), Domingo Barettino Fraile (voc.), Fátima Gebauer Hernández (voc.), Borja Belandia Gómez (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
  • Ciencias de la vida
    • Biología celular
    • Biología humana
    • Biología molecular
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en:  TDX  e-Repositori UPF 
• Resumen

  • Los receptores esteroideos actúan directamente en el núcleo en la organización de la cromatina y en la actividad transcripcional de varios promotores celulares. Por otro lado, estos tienen otro efecto indirecto, menos comprendido en las rutas de transducción de señales citoplasmáticas, afectando en última instancia a la expresión génica. Para el receptor de progesterona (PR), la activación de la ruta de MAPKs en respuesta a progesterona en líneas celulares de cáncer de mama T47D es mediada por la interacción y activación de PR sobre el receptor de estrógenos (ER). Nosotros estamos interesados en distinguir entre los efectos directos de los receptores nucleares y aquellos mediados por las rutas de transducción de señales en la transcripción de genes en respuesta a hormona y proliferación celular. Para esto, hemos expresado establemente en una línea celular T47Dy desprovista de PR, formas variantes marcadas de la isoforma B del PR, en regiones involucradas bien en la unión al DNA(PRB-DBD), o en su habilidad para interaccionar con ER y activar la cascada c-Src/Erk (PRBERID).

    Como esperábamos, el mutante PRB-DBD ha perdido su capacidad para unirse y activar el promotor reportero Mouse Mammary Tumor Virus (MMTV), y PRB-ERID es incapaz de inducir proliferación celular en respuesta a progesterona. Un mutante adicional, PRB-AF2, previamente descrito como incapaz de reclutar coactivadores para la regulación del promotor MMTV, también ha sido probado. La expresión génica en respuesta a progesterona en líneas celulares expresando los PRB salvaje y mutantes ha sido estudiada por hibridaciones en un microarray personalizado conteniendo el cDNA de 750 genes de cáncer de mama. Nuestros resultados definen conjuntos de genes regulados en respuesta a hormona por los diferentes modos de acción del PRB, también genes dónde las rutas nucleares y no genómicas cooperan. Los resultados han sido extensamente validados por RT PCR en tiempo real en experimen